论文部分内容阅读
目的:食管癌是发生在食管鳞状上皮组织的恶性肿瘤,约占所有恶性肿瘤的2%,是世界上最常见的恶性肿瘤之一。目前我国是世界上食管癌死亡率最高的国家之一,年平均死亡率为15.59/10万。近年来,食管癌显著上升,其严重威胁着人民的生命健康。大多数就诊的食管癌患者多为中晚期,治疗方法有手术治疗包括姑息手术和根治手术、放射治疗(根治性放疗和姑息放疗);而外科手术治疗后生存率仍较低。因此,从分子水平探讨食管癌的发生,发展机制及判断预后已成为食管癌研究的关键。从分子生物学的角度,恶性肿瘤可视为基因的疾病,是因某些染色体上的DNA损伤致使基因突变的结果,导致细胞的生长失控、缺乏分化而异常增生,并可侵犯正常组织和器官,最终可散布全身。其发生、发展、侵袭和转移与多个基因和多个分子表达水平密切相关。生长抑制因子蛋白家族(inhibitor of growth family,ING)是一组重要的肿瘤抑制因子,其家族中有5个成员,分别为:INGl,ING2,ING3,ING4,ING5。这五种基因共编码包括INGl基因的3种产物(INGla、INGlb、INGlc)以及ING基因家族其它4个成员的编码蛋白的7种蛋白。其中ING4(inhibitorof growth family member4)基因是近年发现的肿瘤抑制基因,它是由Shiseki M.等于2003年发现的抑癌基因ING家族的新成员。ING4可以参与调节p53基因活性、抑制肿瘤血管的增生、抑制细胞对缺氧状态的适应、细胞接触抑制的丢失以及细胞对化学药物敏感性等影响肿瘤的发生、生长及对肿瘤治疗的多个方面。血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)属于二聚体半胱氨酸结生长因子超家族中的血小板源性生长因子(platelet derived growth factor, PDGF)家族。VEGF是目前发现最重要的血管生长因子,它可与血管内皮细胞特异性地结合,激血管内皮细胞的增殖,诱导血管新生,维持肿瘤生长,从而实现细胞的增殖。目前,研究二者在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达报道较少。本研究通过免疫组化的方法来检测2005年1月-2005年7月我院胸二科手术切除的112例食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)存档蜡块中VEGF和ING4的表达,分析VEGF和ING4表达与食管癌临床病理参数间的关系,进而来分析ING4和VEGF表达的关系,结合临床随访资料,分析其与食管鳞状细胞癌预后关系。方法:在不同分期的食管鳞癌患者的癌组织中,通过免疫组化的方法对ING4和VEGF的表达产物进行分析,来分析ING4与VEGF之间的关系,通过Kaplan-Meier寿命表法分析其与预后的关系。标本来自于2005年1月-2005年7月期间我院胸二科手术切除食管鳞癌存档蜡块112例,其中取35例癌旁正常组织(距癌组织边缘>5cm)作为正常对照组。在112例食管鳞癌组织中,男性77例,女性35例,年龄在32~76岁之间,中位年龄为56岁。入组标准为:根治性切除,临床资料完整,均有术后随访,术前都未接受过化疗及放疗。所有标本都经过福尔马林固定,石蜡包埋,5um连续性切片,都分别进行免疫组化染色及HE染色,阴性对照为PBS液,阳性对照为只加二抗。所有实验数据采用SPSS13.0统计软件处理,计数资料采用χ2检验,两变量之间采用Spearman等级相关分析,应用Kaplan-Meier法计算生存率,进而描绘生存率曲线,应用Log-rank检验分析生存率之间的差异,Cox比例风险回归模型进行多因素分析。以a=0.05作为检验水准,以P<0.05表示差异有统计学意义,P<0.01表示差异具有显著性。结果:1在ESCC组织中,ING4的阳性表达率为53.6%(60/112),而在癌旁正常组织中阳性表达率为87.5%(30/35),二者的差异具有显著性(P<0.01)。2在ESCC中,ING4的表达与患者的性别、年龄、有无淋巴结转移和浸润深度均无关(P>0.05);与ESCC的分化程度及患者的预后有关(P<0.05)。3在ESCC组织中,VEGF的阳性表达率为78.6%(88/112),而在癌旁正常组织中阳性表达率为20.0%(7/35),二者的差异具有显著性(P<0.01)。4在ESCC中,VEGF的表达与患者的性别、年龄、有无淋巴结转移和浸润深度均无关(P>0.05);与ESCC的分化程度及患者的预后有关(P<0.05)。5ESCC中ING4的表达与VEGF表达成负相关(r=-0.284,P=0.002,P<0.01)。Cox比例风险回归模型显示浸润深度、ING4和VEGF均为影响患者预后的重要因素。结论:1在ESCC组织中ING4的阳性表达明显低于癌旁正常组织,提示ING4的低表达可能与ESCC的发生有着密切关系。2在ESCC组织中,ING4高表达者预后好。3在ESCC组织中,VEGF的阳性表达明显高于癌旁正常组织,提示VEGF的高表达可能与ESCC的发生有着密切关系。4在ESCC组织中,VEGF高表达者预后差。5在ESCC中ING4的表达与VEGF表达成负相关。6ING4和VEGF可能是影响ESCC患者预后的独立因素,对判断患者的预后有一定价值。