【摘 要】
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目的:通过观察中药通管助孕方对输卵管阻塞性不孕症大鼠模型炎性因子NF-κB、IκB、COX-2、PGE2及生殖功能的影响,以探讨该方治疗输卵管阻塞性不孕的作用机制,为临床治疗提供理论依据。方法:实验一:抗炎实验将60只昆明小鼠随机分为模型组、中成药组、西药组、通管助孕方高、中、低剂量组,共6组,每组10只,雌雄各半;二甲苯试剂0.05ml/只致炎,切取双侧耳片致炎,计算耳廓肿胀度及肿胀率。实验二:
【基金项目】
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河北省中医药管理局基金资助项目（项目编号:2019199）；
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目的:通过观察中药通管助孕方对输卵管阻塞性不孕症大鼠模型炎性因子NF-κB、IκB、COX-2、PGE2及生殖功能的影响,以探讨该方治疗输卵管阻塞性不孕的作用机制,为临床治疗提供理论依据。方法:实验一:抗炎实验将60只昆明小鼠随机分为模型组、中成药组、西药组、通管助孕方高、中、低剂量组,共6组,每组10只,雌雄各半;二甲苯试剂0.05ml/只致炎,切取双侧耳片致炎,计算耳廓肿胀度及肿胀率。实验二:药效学实验及生殖学实验选用SPF级SD雌性大鼠为研究对象,采用金黄色葡萄球菌注入双侧输卵管内建立输卵管阻塞性不孕大鼠模型。将药效及妊娠实验共140只大鼠,随机分为空白组、模型组、中成药组、西药组及通管助孕方高、中、低剂量组,共7组,空白组20只,模型组20只,剩余各组每组20只。造模后第7天,每组大鼠各20只,连续灌胃给药21天后,药效组大鼠取材处理,生殖组大鼠进行雌雄合笼实验。采用肉眼观察以及HE染色下观察输卵管组织病理形态学变化,透射电镜下观察输卵管组织细胞超微结构变化;采用酶联免疫吸附试验（ELISA法）检测各组大鼠血清中NF-κB、IκB、COX-2、PGE2的分泌水平,采用蛋白质印迹法（Western Blot）检测输卵管组织中NF-κB、IκB、COX-2、PGE2的蛋白表达,采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测输卵管组织中NF-κB、IκB、COX-2、PGE2的m RNA表达水平;观察并记录生殖组大鼠受孕及产仔情况。结果:1.抗炎实验结果:二甲苯致炎后,通管助孕方高、中、低剂量组对小鼠耳肿胀度均有显著的抑制效果（P＜0.05）。2.造模结果:大鼠造模1周后,随机抽取大鼠并解剖取材,肉眼观察及光镜、电镜下观察模型组大鼠输卵管组织形态符合急性炎症病理表现,表明金黄色葡萄球菌接种法可以成功建立SOI模型大鼠,并且经治疗后各组大鼠输卵管均有不同程度的改善。3.对输卵管组织形态的影响:通过解剖学观察及光、电镜观察后,发现通管助孕方高剂量组与模型组、通管助孕方中、低剂量组相比较,能明显减轻输卵管黏膜充血、肿胀、粘连、僵直等情况,促进管腔组织修复。4.ELISA法检测大鼠血清中NF-κB、IκB、COX-2、PGE2的水平:与空白组相比,模型组大鼠血清中NF-κB、COX-2、PGE2的水平升高,血清中IκB的水平降低（P＜0.05）;与模型组相比较,通管助孕方高、中、低剂量组大鼠血清中NF-κB、COX-2、PGE2的水平均显著降低,IκB水平显著升高,有统计学意义（P＜0.05）;与西药组及中成药组比较,通管助孕方高剂量组大鼠血清中NF-κB、COX-2、PGE2的水平显著降低,IκB水平明显升高,有统计学意义（P＜0.05）;由此说明通管助孕方组能够降低输卵管炎性阻塞性不孕大鼠血清中的NF-κB、COX-2、PGE2的水平,升高血清中IκB的水平。5.Western Blot法和RT-PCR法分布检测大鼠输卵管组织中NF-κB、IκB、COX-2、PGE2蛋白和基因表达的水平:与空白组相比,模型组大鼠输卵管组织中NF-κB、COX-2、PGE2蛋白和基因的表达显著升高,IκB蛋白和基因的表达显著下降（P＜0.05）;与模型组相比较,通管助孕方高、中、低剂量组大鼠输卵管组织中NF-κB、COX-2、PGE2蛋白和基因的表达明显下降,IκB蛋白和基因的表达明显升高,有统计学意义（P＜0.05）;与西药组及中成药组比较,通管助孕方高剂量组大鼠输卵管组织中NF-κB、COX-2、PGE2蛋白和基因的表达显著下降,IκB蛋白和基因的表达显著升高,有统计学意义（P＜0.05）;由此说明通管助孕方能够下调输卵管炎性阻塞性不孕大鼠输卵管组织中的NF-κB、COX-2、PGE2蛋白和基因的表达,上调IκB蛋白和基因的表达。6.对生殖功能的影响:模型组妊娠率明显降低,经通管助孕方治疗后,大鼠妊娠率明显升高,产仔数显著增多。通管助孕方高、中、低剂量组妊娠率及平均产仔数与模型组比较有统计学差异（P＜0.05）;说明通管助孕方对输卵管阻塞性不孕症有确切疗效。结论:1.通管助孕方能够明显抑制二甲苯致小鼠耳肿胀度,具有抗炎作用。2.金黄色葡萄球菌接种法可以成功建立SOI模型大鼠。3.通管助孕方治疗输卵管阻塞性不孕症的作用机制与其通过下调NF-κB、COX-2、PGE2的表达,上调IκB的表达,阻断NF-κB信号传导通路的传导有关。4.通管助孕方可以恢复输卵管结构和功能,提高SOI模型大鼠妊娠率及产仔数。
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