河南省猪流感病毒的分离鉴定及生物学特性研究

来源 :河南农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:asgtzyj_lxj
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
猪流感病毒(Swine influenza virus,SIV)为单股负链RNA病毒,属于正黏病毒科A型流感病毒。A、B和C3型的流感病毒都可以感染猪,引起猪流感(Swine influenza,SI)的发生。目前世界各地流行的SIV主要有3种血清型,即古典H1N1,类禽H1N1,类人H3N2。由于猪体内呼吸道上皮细胞上同时存在唾液酸α2,3半乳糖(SAα2,3Gal)和唾液酸α2,6半乳糖(SAα2,6Gal)两种连接类型的受体,降低了猪的种间屏障,使得猪具有被禽流感病毒和人流感病毒感染的能力,从而成为禽和人流感病毒共同的易感宿主,是流感病毒基因重组或重配的“混合器”和流感病毒新流行毒株的孵育器。猪已经成为越来越多不同亚型流感病毒的“中间宿主”。多种不同亚型的流感病毒在我国猪群中长期共存,为产生重排病毒创造了条件,这将对养猪业以及人类公共卫生都具有潜在的威胁。这就赋予了SI在人和动物流感的病原学、生态学及流行病学中占有举足轻重的地位。国际学术界已普遍认为,通过猪可以产生在人群中有流行潜力的病毒株。因此猪流感的影响不仅在于其显而易见的兽医传染病学的意义,更在于其深远的公共卫生意义。本研究从河南省不同地区采集疑似猪流感的病猪鼻拭子,通过鸡胚传代分离病毒,经过血凝、血凝抑制试验及全基因序列测定最终分离到2株猪流感病毒,一株为H3N2亚型,另一株为H1N1亚型。根据流感病毒命名标准体系分别命名为A/swine/Henan/1/2010(H3N2)(SW/HN/1/10)、A/swine/Henan/405/2010(H1N1)(SW/HN/405/10)。为了了解这2株猪流感病毒分离株的分子流行特征,在全基因测序的基础上,与GeneBank上登录的相关参考毒株进行核苷酸及推导氨基酸全序列的同源性比较,并分析HA推导氨基酸蛋白裂解位点、受体结合位点、潜在糖基化位及NA推导氨基酸蛋白酶活性中心位点,二硫键位点、糖基化位点、抗原位点等的变异情况及其系统进化地位。SW/HN/1/10(H3N2)分离株共有8个片段,HA基因有1728个碱基组成,编码567个氨基酸。根据HA基因的核苷酸序列推导出其氨基酸序列,发现其裂解位点为PEKQTR↓G,不符合高致病力毒株的分子特征,提示该分离株为非高致病力毒株;SW/HN/1/10有11个潜在的糖基化位点,与A/Moscow/10/99、A/Sydney5/97、A/NewYork/333/99等经典人源谱系代表株一致。NA基因无氨基酸的插入或缺失,酶活性中心位点,二硫键位点、糖基化位点高度保守,抗原位点有变异。与GeneBank中登录的H3N2亚型人源、经典猪源和禽源SIV进行比较分析显示分离株的8个基因分别与人流感相关基因氨基酸的同源性均在98.5%以上;遗传进化分析表明:SW/HN/1/10的8个基因进化树均处于近代人源谱系Moscow/99-like亚系。由此推测,SW/HN/1/10可能来源于人源流感病毒株。SW/HN/405/10(H1N1)分离株共有8个基因片段,其中HA基因全长1701bp,编码566位氨基酸。根据HA基因的核苷酸序列推导出其氨基酸序列,发现其裂解位点为IPSIQSR↓G,与所有参考毒株的序列一致且没有碱性氨基酸存在。整个蛋白共有7个糖基化位点,其中SIV河南株与欧洲株(Sw/cd/1999)的糖基化位点完全相同,与国内广东株(Sw/gd/2001)香港株(Sw/hh/2001)及美洲株(Swlwi/1998)有三个位点差异。NA基因全长1477Kb,共编码470个氨基酸。对SW/HN/405/10株NA基因推导的氨基酸序列进行分析发现,NA编码区没有氨基酸的丢失与插入,其酶活性中心,二硫键位点高度保守,但抗原位点有变异;NA基因共有6个潜在糖基化位点,其糖基化位点与A/swine/Hong Kong/NS62/2005、A/swine/Belgium/1/1998等类禽谱系代表株一致。与GeneBank中登录的古典的H1N1,类禽H1N1和季节性的H1N1人流感病毒进行比较分析显示分离株的8个基因分别与类禽H1N1流感相关基因氨基酸有较高的同源性(92.1%-99.4%)系统进化树分析结果表明:该分离株的的8个基因进化树均处于类禽型H1N1谱系。由此推测该分离株可能来源于类禽型H1N1猪源谱系。本研究在对分离自河南的两株不同亚型猪流感病毒全基因进行序列测定的基础上,对其遗传演化关系进行分析,从分子水平上探究该病毒的基因来源,为进一步系统的研究河南地区乃至全国SIV抗原变化积累实验数据,为我国的流感防控工作提供了科学依据。
其他文献
《数学课程标准》指出:“数学教学,应从学生已有的知识经验出发,让学生亲身经历参与特定的教学活动,获得一些体验,并且通过自主探索,合作交流,将实际问题抽象成数学模型,并对此进行解释和应用。” 其实,数学本来就源于多彩的生活实践,是人们多彩生活经验总结的结晶和升华。因此,在小学数学教学中,教师要十分认真地学习和深刻地领会《数学课程标准》,深入钻研数学教材,讲究教学方法,坚持以学生的发展为本,强调数学教
摘 要: 生态课堂在近年来的基础教育改革中产生了很大的影响,引起了众多老师的关注和热捧。所谓生态课堂主要是指以人为本,将学生作为课堂教学的主体,遵循平衡规律,实现学生与教师的全面交流。生态课堂的构建正好符合现阶段我国社会主义转型阶段教育提出应该更注重以人文本的基本情况,对于促进教学质量和教学效率的提高具有积极意义。由此可见,将建构式生态课堂教学模式应用于小学数学教学中具有研究价值。本文主要对小学数
日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)是黄病毒科黄病毒属的成员之一,又简称乙脑病毒。此病毒属于嗜神经病毒,以携带病毒的蚊虫为传播媒介在猪、水禽和人类之间进
摘 要: 本文调查了大学英语口头报告教学中存在的问题,制定并实施了改进口头报告教学的行动方案,通过课堂观察、访谈、学生日志等形式进行数据收集,研究结果表明:此次行动研究取得了预期的成效,口头报告应当而且可以成为一种提高语言应用能力的训练形式。  关键词: 大学英语 口头报告 行动研究  一、引言  行动研究是教师在教学过程中,对自己的教学理念、采用的教学方法及由此产生的教学效果进行反思,重新审视自
本文以华莹山矿务局高顶山二矿岩层为对象,进行转体模型相似材料模拟试验。并通过有限元分析研究探讨了倾角为70°和45°的急倾斜煤层开采后,顶、底板围岩移动和支承压力分布
肠三叶肽TFF3是三叶肽家族中最重要的小分子多肽,又称为肠三叶因子(ITF),主要分布于肠道。它由59个氨基酸残基构成,分子量约6.7KDa,属于三叶肽家族,由于具有特殊的“三叶草”空间结
摘 要: 写作是英语学习中需要掌握的一项基本技能,写作课是高职英语课程教学中的一个重要环节,然而高职院校非英语专业学生的实际写作能力却普遍较低。本文通过对浙江东方职业技术学院非英语专业学生的问卷调查,初步了解到目前学生英语写作中存在的问题,设定写作训练的教学设计,以期为学生英语写作水平的提高及英语写作教学提供帮助。  关键词: 高职英语写作 非英语专业 英语写作水平  一、研究背景  英语写作是用
植物甾醇是植物细胞的重要组成成分,广泛存在于植物的根、茎、叶、果实和种子中。植物甾醇具有广泛的生理功能,如:调节胆固醇代谢、抗氧化、调节生长、免疫调节等。本课题研究
摘 要: 随着高等职业教育的发展,英语教学改革能否跟上时代的发展已被提上教学改革的议事日程。教学改革的目标是培养优秀的实用型人才,外语教学的最终目的是促使学生掌握语言技能,提高语言使用能力。  关键词: 职业学校 财会专业 英语 学习状态  自2011年7月开始,我在从事的高职英语课堂教学中,进行了关于五年一贯制高职(财会专业)英语任务型语言教学实践方面的研究。研究的对象是我校2009级财会专业五
煤炭生产过程中,所有环节和工序都会产生粉尘,因而煤矿井下的尘源分布很广.各种尘源的产尘量,由于受矿井地质、开采技术、煤的性质及是否采取防尘措施等诸因素的影响,各矿、