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百合球茎属于百合科,包括几百个品种,如风信子,郁金香和洋葱,在中国广泛种植,且价格低廉,可作为食物和观赏用,百合球茎多糖在肠道(尤其在大肠)的消化吸收功能非常重要,可以防止一些疾病。所以人们将百合多糖提取出来进行研究。
本论文的研究成果主要有以下几部分:
(1)用回流提取、液液萃取、柱层析和有溶剂分步沉淀等方法,从百合中制备了多糖粗提出物。确定了多糖的最优提取条件。采用优于传统回流提取的超声波辅助提取,以蒸馏水为溶剂,在400W下浸提40min,料液比为1:10,多糖得率达1.373%;并对超声波辅助提取机理进行了探讨。
(2)分别探讨了多糖、皂苷、蛋白质的测定方法。采用苯酚—硫酸法结合DNS法对多糖进行测定,确定了最佳检测条件:总糖含量与吸光度值在0.0~73.0 μ g/mL范围内线性关系良好;单糖含量与吸光度值在0.40~2.00mg/mL范围内有良好线性关系。采用改进的考马斯亮蓝法分析测定了多糖中蛋白质的含量,线性回归方程A=0.01238+1.07179x, R=0.9997。
(3)研究了采用酶—Sevag联用法去除多糖中的蛋白质,确定了最佳清除条件:酶解温度60℃,酶解时间4h,1.0mg/mL的木瓜蛋白酶0.5ml,反应pH值6.0;试验结果表明,酶—SeVag联用法萃取三次后,残留蛋白质含量仅为1.22%,清除率高达89.29%。在提取纯化工业中,引入大孔吸附树脂技术,对树脂种类、吸附条件进行了研究。静态吸附结果表明X-5、NKA-9和AB-8树脂的吸附量分别为24.23,39.21和33.06;以乙醇为洗脱剂,X-5、NKA-9和AB-8树脂的洗脱率分别为77%,97.3%,91.9%。静态实验表明XNKA-9树脂具有较好的吸附解吸性能。动态洗脱中采用梯度洗脱方式,结果表明在95%的乙醇洗脱下,多糖纯度可达93.2%。
(4)采用DEAE一纤维素柱和Sephadex G—200为柱填料,通过离子交换层析进一步分离纯化百合多糖。层析柱尺寸为:20×500mm,试验装置简单,吸附及洗脱易于进行。DEAE-纤维素柱上,通过NaCl溶液梯度洗脱,透析后再用乙醇沉淀后得到了两种百合多糖精品LPl、L22。经Sephadex G—200柱进一步分离,证实都为均一组份。对所得两种多糖精品的理化性质及纯度进行了研究,并由紫外和红外光谱分析结果对其结构进行了初步表征。
(5)探讨了百合多糖和皂苷的连续提取工艺,研究了从百合中同时得到多糖和皂苷的提取工艺。采用先醇提后水提的方法,确定了适合的乙醇浓度、提取次数和浓度。可以同时得到高含量的多糖和皂苷产品。