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醛糖还原酶相似蛋白（AKR1B10，ARL-1）属于醛酮还原酶超家族（AKRs），通过代谢醛、酮类产生醇发挥解毒功能。AKR1B10在许多正常组织中都不表达，但在肝脏低水平表达。已有报道，AKR1B10在非小细胞肺癌异常高表达，吸烟史与AKR1B10的表达有相关性，在乳腺癌、直肠结肠癌、宫颈癌和口腔癌等均发现AKR1B10高表达。目前关于AKR1B10与肝癌的关系报道很少。AKR1B10与多种肿瘤相关，但该分子表达与肿瘤发生发展的关系等还有待进一步深入研究。因此，制备高特异性抗AKR1B10单克隆抗体有重要意义。本实验室主要从事肝癌发生发展的相关机制研究，为了进一步了解AKR1B10与肝癌的关系，制备并纯化了抗AKR1B10的单克隆和多克隆抗体，并初步探讨其应用价值。
本研究通过原核表达并纯化AKR1B10全长蛋白。用纯化的AKR1B10-GST蛋白免疫新西兰白兔，获得多克隆抗体（PcAb），间接ELISA法测定多克隆抗体效价为1：96000。用纯化的AKR1B10-GST蛋白免疫Balb/c雌鼠，采用杂交瘤技术制备单克隆抗体（McAb）。采用间接ELISA法对抗AKR1B10单克隆抗体进行筛选，共获得15株稳定分泌抗AKR1B10抗体的杂交瘤细胞株，分别命名为1D2，1D6，1E4，2D8，3E2，4F8，5E3，5G12，10A2，1085，10D2，11B2，1287，12C3，12C12。制备并纯化了5株抗AKR1B10单克隆抗体（1D6，1E4，2D8，5G12，10A2），经鉴定该5株抗AKR1B10单克隆抗体的Ig亚类均为IgG1，轻链属于κ型。用Western blot对这些单克隆抗体进行特异性鉴定，结果均与AKR1B10-GST。特异性结合，而与AKR1B1-GST和GST蛋白无交叉反应。经Western blot技术检测10株肝癌及癌旁细胞系，AKR1B10在有相同来源的高转移肝癌细胞系MHCC97H和低转移肝癌细胞系MHCC97L均高表达。提取24对肝癌及癌旁组织蛋白，Western blot检测，62％（15/24）的肝癌组织存在AKR1B10的异常高表达。免疫组织化学法对9对肝癌组织切片染色，高、中、低分化程度的肝癌组织均存在AKR1B10蛋白的异常高表达。
综上所述，本实验获得了高特异性抗AKR1B10的单克隆和多克隆抗体，初步应用于肝癌组织和细胞的Western blot和免疫组织化学染色检测，提示肝癌组织存在AKR1B10异常高表达，为进一步扩大临床样本，研究AKR1B10蛋白在肝癌组织中异常表达与肝癌分级、临床分期、大体分型的相关性，以明确其是否可以作为肝癌分子标志物及用于早期诊断、治疗靶点的意义；研究AKR1B10表达上调对肝癌细胞系生物学性状的影响及意义等提供了可靠的工具。