麻叶荨麻化学成分及抗炎药理活性初步研究

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麻叶荨麻 (Urtica cannabina L.) 是荨麻属植物,主要分布于我国西北、东北、华北及四川等地,全草或根入药。具有祛风除湿,活血,解痉,解蛇毒等功效。传统主治风湿关节痛、产后抽风、小儿惊风、荨麻疹、毒蛇咬伤等。近年来荨麻的抗炎、抗风湿作用引起了各国学者的注意,国外对同属的大荨麻 (Urtica dioica L.) 研究较多,报道其含有多种化学成分,并具有显著的药理活性,已将其研制开发成多种治疗风湿性关节炎及良性前列腺增生的药物。而关于麻叶荨麻化学成分及药理作用的研究尚无报道,故本文对麻叶荨麻进行了初步研究。目的:对麻叶荨麻叶的化学成分进行系统研究,利用硅胶柱色谱、聚酰胺柱色谱、大孔吸附树脂柱色谱及葡聚糖凝胶柱色谱等分离方法对其化学成分进行分离纯化,得到单体化合物。应用UV、IR、1H-NMR、13C-NMR、MS等检测分析手段对各单体化合物进行结构鉴定,确定分子式及分子结构,为寻找麻叶荨麻抗炎、抗风湿活性成分提供基础性研究。对麻叶荨麻叶的抗炎药理活性进行初步研究,确定活性提取溶剂,为进一步进行药物的活性筛选奠定基础。方法:1、麻叶荨麻叶化学成分的系统预试验:取干燥麻叶荨麻叶4份,每份10g,分别制成酸性乙醇提取液、水提取液、甲醇提取液以及石油醚提取液。按照化学成分系统预试验的方法对叶中所含各类化学成分进行检识。2、麻叶荨麻叶化学成分的提取、分离及结构鉴定:干<WP=4>燥麻叶荨麻叶2kg用95%乙醇15L室温浸泡三次,每次三天。提取液减压浓缩后得浸膏200g,分别用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,得各部分萃取物35.4g、15.8g、22.2g、12.2g。其中石油醚部分经硅胶柱色谱分离,用石油醚-乙酸乙酯进行梯度洗脱,得白色固体Ⅰ(石油醚-乙酸乙酯 9:1)、Ⅱ(石油醚-乙酸乙酯 8:2)、Ⅲ(乙酸乙酯洗脱)。以上三部分再经硅胶柱色谱纯化后得化合物1 (10mg)、化合物2 (40mg)、化合物3 (10mg)。将95%乙醇浸提后的药渣晾干,再用80%乙醇15L回流提取,每次2小时,提取三次。提取液减压浓缩后得浸膏180g,分别用石油醚、乙醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取,得各部分萃取物12.2g、10.0g、15.0g、8.0g。其中乙酸乙酯部分经聚酰胺柱色谱分离,50%乙醇洗脱部分得黄色固体Ⅳ。正丁醇部分经D101型大孔吸附树脂和硅胶柱色谱分离,得黄色固体Ⅴ。黄色固体Ⅳ和Ⅴ经葡聚糖凝胶柱色谱纯化后得化合物4 (200mg)、化合物5 (30mg)。运用化学方法和UV、IR、1H-NMR、13C-NMR、MS等波谱分析对化合物2、4、5进行了结构鉴定。3、抗炎药理活性初步研究:受试药物的制备,麻叶荨麻叶分别用80%乙醇和水热提取,将提取液减压浓缩至1g/ml(生药/药液)。采用二甲苯致小鼠鼠耳肿胀药理模型,阿司匹林为阳性对照药物,研究麻叶荨麻叶的抗炎药理活性。结果:1、麻叶荨麻叶化学成分系统预试验结果表明,其叶中含有黄酮、甾醇、有机酸、苷类、酚类化合物及糖类、蛋白质、氨基酸、油脂等成分。2、麻叶荨麻叶的化学成分研究:通过溶剂提取法和色<WP=5>谱法从中提取分离得到5个单体化合物,对化合物2、4、5进行了结构鉴定。鉴定结果:化合物2为β-谷甾醇(β-sitosterol),化合物4为黄芩素-7-O-α-L-鼠李糖苷(Scutellarein-7-O-α-L-rhamnoside),化合物5为芹菜素-6,8-二C-β-D-葡萄糖苷 (Apigenin-6,8-di-C-β-D-glucoside,又名Vicenin-2)。3、抗炎药理实验结果:麻叶荨麻叶提取物对二甲苯所致小鼠鼠耳肿胀药理实验结果表明,在其水煎液和80%乙醇提取液中,水煎液能明显对抗二甲苯所致小鼠鼠耳肿胀(P<0.01),其疗效与阳性对照药物阿司匹林相当。水煎液的低、中、高三个剂量均能不同程度的抑制小鼠鼠耳肿胀,其中中、高剂量疗效显著(P<0.01)。结论:化学成分研究中提取溶剂和提取方法选择适当,采用硅胶、大孔吸附树脂、聚酰胺、葡萄糖凝胶等柱色谱法,对麻叶荨麻叶的化学成分实现了较好的分离及纯化。经结构鉴定的3个单体化合物均为首次在该属植物中发现,为进一步研究其抗炎活性成分提供了物质基础。对麻叶荨麻叶的抗炎药理实验研究表明,麻叶荨麻叶的水煎液具有显著的抗炎活性,极性成分是其抗炎药理作用的活性成分。
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