论文部分内容阅读
目的在目前针灸治疗中风病的基础上,结合现代药理学研究基础制备胶原川芎嗪缓释剂,研究在大椎、双侧内关穴位埋药对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑梗死体积的影响以及穴位埋药对基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及其抑制剂-1(TIMP-1)的调节作用。方法选用健康SD大鼠160只,随机分为6组,正常组10只,假手术组30只(24h组、72h组、120h组各10只),模型组30只(24h组、72h组、120h组各10只),腹腔注射组30只(24h组、72h组、120h组各10只),电针组30只(24h组、72h组、120h组各10只),穴位埋药组30只(24h组、72h组、120h组各10只)。采用大脑中动脉线栓法(MCAO)制备缺血再灌模型,以胶原川芎嗪制备的缓释剂(药线)在大椎、双侧内关穴位埋药。每组中分别取4只大鼠直接断头取新鲜脑组织作TTC染色处理;另外6只大鼠以10%水合氯醛麻醉,4℃4%多聚甲醛200ml(含0.1%DEPC)心脏灌注,迅速取脑,在视交叉平面前后2mm处将脑冠状切开,留取中间部分置于4℃4%多聚甲醛固定液中过夜,将固定后的脑组织进行石蜡包埋。分别运用免疫组化法检测缺血皮质区MMP-9与TIMP-1含量的变化以及穴位埋药对上述指标的影响,采用HPIAS-1000计算机高清晰彩色图像分析仪对切片进行图像分析,结果进行统计学处理。结果1.大脑中动脉缺血再灌注可明显损害大鼠的正常行为活动。腹腔注射、电针、穴位埋药组大鼠神经体征均有明显改善,与模型组比较有显著性差异(P<0.05,P<0.01),其中穴位埋药能明显改善大鼠神经体征(与腹腔注射组比较,P<0.01;与电针组比较,P<0.05)。2.脑缺血再灌后经TTC染色可见缺血区有明显的梗死灶,腹腔注射、电针、穴位埋药均能减轻缺血再灌后脑梗死体积,与模型组比较有显著性差异(P<0.01),其中穴位埋药能明显缩小脑梗死体积(与腹腔注射组比较,P<0.01;与电针组比较,P<0.05)。3.免疫组化结果显示脑缺血再灌后缺血区脑组织中MMP-9表达增高、TIMP-1表达降低,腹腔注射、电针均能下调MMP-9表达、上调TIMP-1的表达,与模型组比较有显著性差异(P<0.05),其中穴位埋药24h对MMP-9、TIMP-1的调节作用并不明显(与模型组比较,P>0.05;与腹腔注射组比较,P>0.05),其优势作用表现在72h和120h(与腹腔注射组、电针组比较,P<0.05)。结论大鼠局灶性脑缺血再灌损伤后缺血区脑组织中MMP-9表达增高、TIMP-1表达降低,导致脑微血管结构完整性的破坏,脑梗死体积增加,加重缺血再灌注损伤。穴位埋药可以通过下调MMP-9表达、上调TIMP-1的表达而保护脑微血管结构的完整性,减轻脑梗死体积,从而起到脑保护作用。