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巨噬细胞是非常重要的免疫细胞,参与机体针对感染的固有免疫和适应性免疫应答。Y干扰素(IFN-γ)致敏巨噬细胞后,可以诱导巨噬细胞经典激活并增强其抗炎能力,但其中的具体机制仍不清楚,以往的研究主要集中在IFN-γ和TLR信号通路的相互作用上。IFN-γ可以通过协同作用于TLR信号通路或抑制TLR诱导的负反馈环路从而致敏巨噬细胞。miRNA参与机体的免疫应答调控,但对于miRNA是否参与IFN-y对巨噬细胞的致敏过程仍不是十分清楚。我们发现IFN-y预刺激小鼠骨髓来源的巨噬细胞后,巨噬细胞中TLR4激动剂LPS诱导的促炎因子的表达显著增加,而其吞噬能力显著下调。通过对IFN-y刺激骨髓来源巨噬细胞(BMMs)的高通量miRNA芯片检测分析,发现IFN-γ可以显著下调miR-133b-5p、miR-5130和miR-3473b的表达。高表达miR-133b-5p、miR-3473b和miR-5130的模拟物可以抑制IFN-y对巨噬细胞的致敏,促进LPS诱导的IL-10的表达。进一步研究发现,miR-133b-5p和miR-5130并不能直接靶作用于IFN-y的下游信号分子STAT1.抑制miR-133b-5p和miR-5130可以抑制PI3K-Akt信号通路从而抑制GSK3的磷酸化,促进其酶活性,抑制IL-10的产生,而miR-3473b的模拟物则可以促进Akt与GSK3的磷酸化。报告基因实验证实PI3K-Akt信号通路中的抑制性分子PTEN作为miR-3473b的靶分子,其表达可以被miR-3473b所抑制。干扰PTEN的表达可以抑制巨噬细胞对LPS的应答。因此,我们的实验证明IFN-y可以通过降低miR-3473b、miR-133b-5p和miR-5130的表达,上调PI3K-Akt信号通路中的抑制性分子的表达,抑制GSK3的磷酸化失活,进一步抑制IL-10的产生,从而抑制TLR的负反馈环路,最终促进巨噬细胞活化,增强其抵御病原体入侵的能力。