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本文研究目的:以食管癌造模大鼠为研究对象,应用现代医学的实验技术,重点观察了地黄管食通口服液对原癌基因c-myc、端粒酶逆转录酶(hTERT)活性表达以及食管癌细胞凋亡的影响,从细胞分子水平探讨其作用机制,为临床应用提供科学的理论依据。
研究方法:选取健康Wistar大鼠,除空白对照组外,其余大鼠均背部皮下注射甲基戊基亚硝胺(MANA)5mg/kg连续20周,末次注射后将造模大鼠随机分为食管癌组和放疗组;放疗五天结束后再将所有放疗大鼠分为单纯放疗组和药物治疗组。整个实验分组:①空白对照组(空白组);②食管癌造模组(食管癌组);③单纯放疗组(单放组);④六味地黄丸组(六味组);⑤地黄管食通低剂量组(低剂量组);⑥地黄管食通中剂量组(中剂量组);⑦地黄管食通高剂量组(高剂量组)。放疗结束后每天灌服受试药物一次,共5周。实验结束后处死大鼠检测下列指标:①免疫组化S-P法检测大鼠食管组织c-myc基因蛋白和hTERT的表达;②原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,并计算凋亡指数。
研究结果:①c-myc蛋白表达:与食管癌组相比除单放组(P>0.05)外各药物治疗组均有极显著性差异(P<0.01);与单放组比较,各药物组均呈递减趋势,但只有高剂量组优于单放组(P<0.05);与六味组相比,从管食通低、中、高剂量组呈递减趋势。②hTERT活性表达:与食管癌组相比除单放组(P>0.05)外各药物治疗组均有极显著性差异(P<0.01);与单放组比较,中剂量组有显著性差异(P<0.05),高剂量组有极显著性差异(P<0.01);与六味组相比,从管食通低、中、高剂量组呈递减趋势。③TUNEL检测:各组均见细胞凋亡,各治疗组细胞凋亡指数均明显高于空白组及食管癌组(P<0.01);六味组与低剂量组及单放组比较无明显差异(P>0.05);中剂量组及高剂量组明显高于单放组和六味组(P<0.01)。
研究结论:地黄管食通口服液可能通过抑制c-myc基因突变、下调hTERT活性表达从而抑制端粒酶活性最终诱导食管癌细胞凋亡。