多粘类芽孢杆菌液态发酵花生粕及其特性研究

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花生粕是一种富含蛋白质和多种氨基酸的物质,难以直接被植物吸收的粗蛋白限制了其直接作为植物肥料,而根际促生菌能高效分解花生粕,从而促进植物对营养的吸收。本研究筛选出一株可高效分解花生粕的多粘类芽孢杆菌,并对其进行蛋白酶活的测定、生长特性测定和高密度培养、液体降解花生粕发酵工艺研究和液体降解花生粕中试研究。试验结果如下:(1)对8株菌株进行蛋白酶水解圈试验,发现一种多粘类芽孢杆菌的透明圈直径和菌落直径的比值最大,为3.530。对该菌株进行蛋白酶活力的测定,测定结果为6.76U/mL,表明该菌株具有产生蛋白酶、分解蛋白质的能力。(2)对筛选出的多粘类芽孢杆菌进行了生长特性测定和高密度培养研究。确定的最佳培养条件如下:pH为6.0、温度为35℃、培养时间为48h、装液量为100mL/250mL、接种量为3%、摇床转速为150r/min。(3)研究了该菌株降解花生粕的液态发酵工艺。得出最佳发酵工艺为:发酵时间为5d、发酵温度为34℃、料液比为1:15、接种量为2%、花生粕与葡糖糖比例为8:2。在此条件下,发酵后水解度为94.4%。(4)在降解花生粕中试试验中,对发酵前后的pH、活菌菌量、溶解氧、粗蛋白、氨基酸、小肽进行了测定。结果如下:pH值从5.81降到5.28,减少了0.53;活菌菌量从0增长到2.62×10~8CFU/g;溶解氧从8.2mg/L降为0;粗蛋白从51.84%升高到59.70%,增加了7.86%;氨基酸总量从14.42%升高到16.71%,增加了2.19%;小肽含量从2.38%升高到9.01%,增加了6.63%。由此可见,该多粘类芽孢杆菌在确定的发酵罐环境中得到了较好的繁殖并且分解了花生粕。该试验通过水解圈筛选、生长特性测定和高密度培养研究、菌株降解花生粕的液态发酵工艺研究、降解花生粕中试试验,筛选出了一株可以高效分解花生粕的菌株,优化了菌株的最佳培养条件和发酵工艺条件,为今后该菌株的高密度培养方式提供了依据,也为研制液体有机肥提供了资源。
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