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近年来,低聚壳聚糖由于其功能的多样性和独特性,而广泛受到关注。本论文主要对纤维素酶降解壳聚糖的水解条件及酶促反应动力学进行了研究,并用乙醇分布沉淀法获得不同聚合度的低聚壳聚糖。通过研究纤维素酶降解壳聚糖各因素对酶反应速度影响,得到以下结论:在pH5.0,60℃下酶促反应速度最大;并且在反应的前3.5 h,反应时间与酶反应速度是线性增加的;当底物浓度一定,酶浓度在0.050.3 IU/mL范围内,酶促反应速度随酶浓度呈线性增加。在低底物浓度下,纤维素酶降解壳聚糖符合米氏方程的规律,其米氏常数Km=9.34 mg·mL-1,最大反应速度Vm=7.96 mg·L-1·min-1。此外,酶反应速度还受壳聚糖脱乙酰度的影响。实验表明,在较高的脱乙酰度范围(DD>80%)内,酶反应速度随着脱乙酰度的升高而下降。通过对纤维素酶水解壳聚糖的条件研究,得出纤维素酶水解壳聚糖的最佳作用温度是50℃,最适作用pH为5.0。用高效液相(HPLC)和质谱(MS)分析不同底物浓度水解液中各组分,结果发现,3%壳聚糖水解液中2-5低聚糖比例为99.05%,确定了壳聚糖的最佳底物浓度为3%。通过研究水解率及还原糖变化,确定了最佳酶加入量是6 IU/(g底物);通过薄板层析(TLC)对不同水解时间下产物分析,得到最佳水解时间为16 h。采用乙醇分布沉淀法提取水解液中的低聚壳聚糖,并对所得各组分分析。实验结果表明,采用乙醇分布沉淀法,75%乙醇沉淀可去除聚合度9以上的壳聚糖,87.5%乙醇沉淀可去除聚合度7以上的壳聚糖。经薄板层析(TLC)和质谱(MS)分析发现,87.5%醇沉上清液主要为聚合度为7以下的低聚壳聚糖。而由1%、3%、5%、10%壳聚糖水解液得到的87.5%醇沉上清各自得率分别是93%、66.7%、68.4%和54.4%,而醇沉壳寡糖得率分别是4%、15.6%、25%和29.1%。