穴位敷贴抗哮喘豚鼠气道炎症及其机制研究

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支气管哮喘(bronchial asthma)简称哮喘,是以嗜酸性粒细胞浸润为主、多种炎症细胞介导的慢性变态反应性炎症疾病。哮喘是一种最为常见、多发的变态反应性疾病,目前全球患者近3亿。随着工业化及全球污染的加剧,哮喘的患病率和死亡率均呈逐渐上升趋势,严重危害患者的身心健康与生活质量,特别是对青少年患者的学习成长影响更为明显。近年来大量的临床和实验研究表明,中药穴位敷贴对哮喘疗效独特,特别是在减少副作用、预防复发方面较西药有明显优势。本文概述了历代中医学家对哮喘的病名、病因病机,辨证施治的认识。对穴位敷贴疗法及其治疗支气管哮喘的现代临床与机理研究作了全面地总结。阐述了现代医学对哮喘的流行病学、病因病机的认识以及基础研究的新进展,如嗜酸性粒细胞EOS及其凋亡在哮喘发病中的意义等。分析了当前西医治疗哮喘的局限、困惑及中西医结合的切入点。展望了下一步研究的方向。 研究目的 本课题采用国际公认的卵蛋白致敏法建立哮喘豚鼠模型,选择与哮喘慢性气道炎症关系密切的支气管病理(EOS浸润)与超微结构、EOS凋亡及凋亡相关基因Fas、FasL、bcl-2、相关细胞因子TNF、IL-2、TGF-β1、黏附分子ICAM-1、VCAM-1、L、E、P选择素为切入点,检测穴位敷贴治疗后上述指标的变化,以探讨穴位敷贴对哮喘慢性气道炎症的抗炎作用及其机理。 研究方法 将40只Hartly豚鼠随机分为对照组、模型组、穴位敷贴组、地塞米松组,每组10只:采用Itoh K报道的卵蛋白腹腔注射致敏后呼吸道吸入激发法制备哮喘豚鼠模型。穴位敷贴组于大椎、肺俞、肾俞穴处脱毛后,将敷贴药物固定于穴位处。每次敷药6小时,隔日治疗一次,共治疗7次。地塞米松组采用腹腔注射地塞米松0.5mg/kg,治疗时间与次数同敷贴组。模型组与正常对照组未予任何治疗。治疗结束后对外周血EOS进行自动计数、HE染色观测支气管肺EOS浸润程度;透射电镜观察支气管上皮细胞及EOS超微结构;TUNEL法检测支气管肺组织EOS凋亡;免疫组化法检测支气管肺组织凋亡相关基因Fas、FasL、bcl-2表达以及黏附分子ICAM-1、VCAM-1、L、E、P选择素表达;酶联免疫法检测血清可溶性细胞黏附分子ICAM-1、VCAM-1、L、E、P选择素水平;放射免疫法检测细胞因子TNF、IL-2、TGF-β1水平。所测数据均
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