ARMS2对视网膜色素上皮细胞吞噬功能的影响

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目的研究年龄相关性黄斑变性易感因子2(age-related maculopathy susceptibility2,ARMS2)在体外培养的人视网膜色素上皮细胞系ARPE-19及人视网膜组织中的表达情况,观察ARMS2对ARPE-19细胞吞噬功能的影响,以探讨其在年龄相关性黄斑变性发生中可能发挥的作用。方法应用RT-PCR验证ARMS2是否在ARPE-19细胞和人视网膜组织中表达。通过免疫组织化学染色法检测ARMS2在ARPE-19细胞和人视网膜组织内的表达量及表达部位。采用siRNA技术抑制ARMS2在ARPE-19细胞中的表达,RT-PCR、免疫组化检测抑制效率;以FITC标记的乳胶微球孵育细胞,流式细胞术检测ARPE-19细胞吞噬功能;比较ARMS2被抑制前、后ARPE-19细胞在不同时间点吞噬水平的变化。结果ARMS2在ARPE-19细胞和人视网膜组织中均有表达。在ARPE-19细胞中,ARMS2表达于细胞质中。在人视网膜组织中,ARMS2表达在RPE层,其中在顶部膜的表达量最丰富。实验组(ARMS2-siRNA) ARMS2的表达水平(0.73±0.08)与正常组(1.00±0.00)及对照组(scrambled siRNA,0.95±0.13)相比明显下降,差异均有显著性,P值均小于0.05;在FITC-乳胶微球孵育后的12h、18h、24h三个时间点,实验组(ARMS2-siRNA)的荧光强度分别为38.04±1.02,68.92±0.92,78.00±0.12,对照组(scrambled siRNA)分别为77.98±5.43,94.87±0.60,98.30±0.11;实验组和对照组在12h、18h、24h三个时间点的荧光强度分别行student’s t检验,P值均小于0.01。结论ARMS2在ARPE-19细胞和人视网膜组织中均有表达。ARMS2与ARPE-19细胞的吞噬功能相关,这可能是其参与年龄相关性黄斑变性发生的机理之一。
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