Bioaggregate对成骨细胞和牙周韧带成纤维细胞生物学行为的影响

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一种理想的根管充填材料必须满足以下条件:良好的生物相容性,较强的根尖封闭能力和根尖再生能力,有效的抗菌效果,足够的X线阻射能力和优良的可操作性。MTA近年来在牙科领域得到了广泛的应用,是由于其在生物相容性和矿化诱导方面所表现的良好性能。Bioaggregate作为一种新型的根管充填材料,被认为是可能替代MTA的新型材料。在根管治疗过程中,成骨细胞和牙周膜细胞是直接与根管充填材料发生物理性接触的相关细胞并且在根尖周疾病愈合过程中发挥了重要作用。因此,根管充填材料对其周围的相关细胞的生物学行为的影响成为根管治疗领域研究的热点。大量研究证明MTA对成骨细胞和牙周膜细胞等显示出了较好的生物相容性,并能促进根尖周组织的愈合。但是,关于Bioaggregate对相关细胞的生物学行为的影响鲜见报道。本课题首次研究Bioaggregate对成骨细胞和牙周韧带成纤维细胞的生物学行为的影响,为Bioaggregate应用于临床治疗提供科学依据。目的:检测Bioaggregate对成骨细胞MC3T3-E1的细胞毒性作用,探讨其与成骨细胞的生物相容性。方法:将成骨细胞MC3T3-E1接种在96孔板中,随机分为3组,第一组中不加入任何材料(对照组),第二组加入MTA共培养(MTA组),第三组加入Bioaggregate共培养(Bioaggregate组)。在共培养的第1,2,3天,利用MTT方法比较三组之间的细胞存活量。结果:MTT结果显示在细胞培养的整个过程中,三组之间的成骨细胞数目之间没有显著性差异。结论:Bioaggregate与MTA均对成骨细胞没有明显的细胞毒性作用。目的:检测Bioaggregate对成骨细胞MC3T3-E1细胞外基质矿化基因表达的影响,探讨Bioaggregate与成骨细胞矿化的关系。方法:将成骨细胞MC3T3-E1接种于24孔板中,随机分为3组,第一组中不加入任何材料(对照组),第二组加入MTA共培养(MTA组),第三组加入Bioaggregate共培养(Bioaggregate组)。在共培养的第1,2,3天,利用qRT-PCR检测与成骨细胞外基质矿化相关基因COLⅠ, OCN, OPN的mRNA表达,比较三组之间同一基因在不同培养阶段的表达变化,统计方法分析三组之间的显著性差异。结果:在细胞共培养的第1天,Bioaggregate与MTA均能抑制COLⅠ, OCN, OPN的表达。在第2,3天,Bioaggregate组和MTA组的COLⅠ基因表达与对照组比较没有显著性差异,但是Bioaggregate较MTA更能提高COLⅠ的基因表达。在第2天,Bioaggregate能够明显提高OCN的基因表达,而MTA却抑制其表达。在第3天,与其它2组进行比较,Bioaggregate能够显著提高OPN的基因表达水平。结论:与MTA相比,Bioaggregate能够诱导成骨细胞MC3T3-E1矿化相关基因COLⅠ,OCN, OPN的表达。目的:检测Bioaggregate对牙周韧带成纤维细胞的细胞毒性作用,探讨其与牙周韧带成纤维细胞的生物相容性。方法:牙周韧带成纤维细胞取自人的牙周组织并进行原代培养,传代后将其接种于96孔板,随机分为3组,第一组中不加入任何材料(对照组),第二组加入MTA共培养(MTA组),第三组加入Bioaggregate共培养(Bioaggregate组)。在共培养的第1,2,3天,利用MTT方法比较三组之间的细胞存活量。结果:Bioaggregate组与对照组比较,其细胞数目没有显著性差异,但是MTA抑制牙周韧带成纤维细胞的增值。结论:Bioaggregate对牙周韧带成纤维细胞没有明显的细胞毒性作用,而MTA该细胞具有一定的细胞毒性作用。目的:检测Bioaggregate对牙周韧带成纤维细胞成骨分化相关基因表达的影响,探讨Bioaggregate与牙周韧带成纤维细胞生物学行为变化的关系。方法:将牙周韧带成纤维细胞接种于24孔板中,随机分为3组,第一组中不加入任何材料(对照组),第二组加入MTA共培养(MTA组),第三组加入Bioaggregate共培养(Bioaggregate组)。在共培养的第3,5,7天,利用qRT-PCR检测与牙周韧带成纤维细胞成骨分化相关基因COLⅠ, ALP, NID2的mRNA表达,比较三组之间同一基因在不同培养阶段的表达变化,统计方法分析三组之间的显著性差异。结果:在细胞共培养的全过程中,Bioaggregate和MTA均能促进COLⅠ基因的mRNA表达。Bioaggregate在第7天能够明显提高ALP基因的表达水平,而MTA在第3天增强其表达。Bioaggregate在第3,5,7天增强NID2基因表达,而MTA在第3天促进其表达。结论:Bioaggregate能够通过提高牙周韧带成纤维细胞成骨分化相关基因的mRNA表达水平,从而促进其成骨分化。
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