甜樱桃(Prunus avium L.)属于落叶果树,需要一定的低温积累才能打破休眠,而南方等暖冬地区温度高,低温积累不足,导致其无法正常生长发育。目前对筛选甜樱桃短低温品种的研究很少,对甜樱桃与休眠相关的MADS-box基因的克隆和调控机制尚未见报道。本研究的内容及结果如下:1.从北京、大连、泰安、郑州和上海采集大量的甜樱桃枝条,通过离体湿沙培养法,将低温积累到一定时间的甜樱桃枝条置于适宜条件下培养,3周后统计萌芽率,确定各品种需冷量区间范围,分析甜樱桃萌芽率变化和品种差异,并对不同地区的相同甜樱桃品种的需冷量进行比较。结果表明,需冷量在400~800h的品种最多,其中<600h的品种28个,发现采集样品时各品种所处的休眠阶段不同,甜樱桃不同地区的相同品种的需冷量差异较小。2.选用中需冷量品种‘布鲁克斯’和低需冷量品种‘罗亚李’作为试验材料,克隆了4个与休眠相关的MADS-box基因,命名为PaDAM3、PaDAM4、PaDAM5、PaDAM6,cDNA全长分别为720bp、675bp、729/708bp和723bp。3.对中高需冷量品种‘红灯’、中低需冷量品种‘先锋’、‘美早’和‘布鲁克斯’以及低需冷量品种‘罗亚李’、‘罗亚明’整个休眠过程的基因表达量进行分析,荧光定量PCR检测结果显示,4个基因的相对表达量随着低温的积累总体趋势均为先上调后下调,并且中需冷量品种中起主导作用的基因是PaDAM4,而低需冷量品种的PaDAM5和PaDAM6表达量高。4.选‘先锋’和‘罗亚李’各10棵树施用浓度为2%的单氰胺,另各选10棵树喷施清水作为对照,利用荧光定量PCR技术检测处理组和对照组基因相对表达量在喷施单氰胺和清水后的变化,结果发现,单氰胺对中需冷量品种有促进打破休眠的作用,而对低需冷量品种影响不大。