目的:1.研究藏红花苷-1在常氧及缺氧大鼠体内吸收的差异,并分析藏红花苷-1的主要代谢产物。2.建立外翻肠囊模型,探究藏红花苷-1在常氧及缺氧大鼠不同肠道吸收的差异,结合体内实验,分析藏红花苷-1吸收的主要肠道。3.研究藏红花苷-1主要代谢产物——藏红花酸在常氧及缺氧大鼠体内各组织分布差异,分析急性缺氧损伤是否会造成藏红花酸的组织分布变化。方法:1.采用UPLC-Q-TOF-MS技术,建立同时测定大鼠血浆中藏红花苷-1和藏红花酸的方法。选取SPF级雄性Wistar大鼠12只,随机分为2组（常氧组和缺氧组）,每组6只。常氧组大鼠于普通环境饲养（兰州,海拔为1440 m）;缺氧组置于低压低氧动物实验舱中,以10 m·s-1的速度升至7500 m高度,进行急性缺氧处理72 h,缺氧期间,动物自由进食饮水,给药前12 h禁食不禁水。藏红花苷-1以灌胃方式给药(灌胃剂量为400mg·kg-1,灌胃体积为10.0 m L·kg-1),分别在给药后5、15、30、45 min、1、2、4、6、8、12、24、36、48、72、84 h后眼底静脉丛采血200μL,测定常氧和缺氧组大鼠血浆中藏红花苷-1和代谢产物藏红花酸的含量,并分析藏红花苷-1在大鼠体内的代谢产物。2.采用UPLC法建立大鼠肠囊液中藏红花苷-1的测定方法。选取SPF级雄性Wistar大鼠12只,随机分为2组（常氧组和缺氧组）,每组6只。缺氧组进行模拟急性海拔7500 m缺氧处理72 h,实验前12 h禁食不禁水。随后将大鼠用麻醉剂腹腔麻醉,沿腹白线剖开,分别取大鼠十二指肠、空肠和回肠,将取出的肠道移到0℃台氏液中,用注射器冲洗干净,并剥离表面的肠系膜及脂肪。将直肠给药管插入肠管,小心翻转肠道,使肠内壁面向外,用0℃台氏液冲洗内表面,再用手术线分别将翻转后的肠道一端结扎,另一端结扎于直肠给药管,形成囊状。向肠囊内注入2 m L的空白台氏液,平衡5 min,将不同肠道放入含有藏红花苷-1(200μg·m L-1)的台氏液的试管中,置于37℃恒温水浴锅,并向试管中通入含95%氧气和5%二氧化碳气体。分别在不同时间点（0,30,60,90,120 min）从肠囊内取样200μL,同时补加37℃同体积的空白台氏液。实验结束后将肠管纵向剖开,自然摊于滤纸上测量长度和宽度,记录吸收面积。比较常氧及缺氧大鼠不同肠道对藏红花苷-1吸收差异。3.采用UPLC法建立测定大鼠各组织中藏红花酸（藏红花苷-1代谢产物）含量方法。选取SPF级雄性Wistar大鼠12只,随机分为2组（常氧组和缺氧组）,每组6只。缺氧组进行模拟急性海拔7500 m缺氧处理72 h,实验前12 h禁食不禁水。灌胃给药剂量为300 mg·kg-1藏红花酸（藏红花苷-1代谢产物）,灌胃体积为10.0 m L·kg-1。给药2 h后,将大鼠迅速处死,摘取大鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、大脑和睾丸,测定常氧和缺氧组大鼠各组织中藏红花酸的含量,并分析缺氧环境对大鼠体内藏红花酸分布的影响。结果:1.与常氧组相比,缺氧组大鼠药代动力学参数发生改变,AUC是常氧组大鼠的10倍左右;缺氧组大鼠体内藏红花苷-1的MRT、T1/2、Tmax均有延长,药物峰浓度升高,存在显著性差异;缺氧组大鼠体内藏红花苷-1的表观分布容积下降。质谱分析得出,藏红花苷-1进入体内后主要代谢为藏红花酸,藏红花酸在体内代谢出现“双峰”现象;其他代谢产物可能为藏红花苷-3和藏红花单葡萄糖醛酸。2.与常氧组相比,缺氧组大鼠的十二指肠、空肠和回肠在1.0和1.5 h对藏红花苷-1的吸收差异显著。同一时间点不同肠道对藏红花苷-1吸收量存在差异。十二指肠和回肠为藏红花苷-1的主要吸收部位,回肠对藏红花苷-1的吸收能力较弱,常氧组大鼠2.0h的十二指肠与空肠单位面积吸收量存在显著性差异,1.0～2.0 h的空肠与回肠单位面积吸收量存在显著性差异;缺氧组大鼠0.5～1.5 h的空肠与回肠单位面积吸收量存在显著性差异,2.0 h时存在极显著性差异。3.直接给予大鼠大剂量藏红花酸（藏红花苷-1代谢产物）后,藏红花酸在常氧和缺氧大鼠体内的分布存在差异,常氧组大鼠体内藏红花酸组织分布浓度由高到低依次为肝（29）肺（29）脾（29）睾丸（29）肾（29）心（29）大脑;缺氧组大鼠体内藏红花酸组织分布浓度由高到低依次为肝（29）肺（29）睾丸（29）脾（29）心（29）肾（29）大脑。其中缺氧组大鼠的心、肾、大脑和睾丸组织中藏红花酸的含量较常氧组大鼠升高,且大脑和睾丸差异显著;而缺氧组大鼠的肝、脾和肺中藏红花酸的含量均表现为下降,其中以肺组织最明显。结论:1.藏红花苷-1口服能吸收进入体内,且缺氧会导致藏红花苷-1吸收增加,藏红花苷-1的主要代谢产物为藏红花酸,其他代谢产物可能为藏红花苷-3和藏红花单葡萄糖醛酸。主要代谢产物藏红花酸在大鼠体内出现“双峰”现象,提示藏红花酸的代谢可能存在“肝肠循环”。2.缺氧环境对藏红花苷-1的吸收有一定的促进作用,原因可能是:（1）缺氧环境可能会造成肠道损伤,改变肠道通透性,导致缺氧大鼠肠囊单位面积吸收率较常氧大鼠增加;（2）在缺氧环境中,藏红花苷-1在大鼠体内吸收量极显著增加,而体外实验吸收量无体内明显,藏红花苷-1的吸收和代谢可能与肠道和肠道微生物存在关联。3.藏红花苷-1代谢产物——藏红花酸在常氧及缺氧大鼠体内分布存在差异,常氧大鼠体内藏红花酸组织分布浓度由高到低依次为肝（29）肺（29）脾（29）睾丸（29）肾（29）心（29）大脑;缺氧大鼠体内藏红花酸组织分布浓度由高到低依次为肝（29）肺（29）睾丸（29）脾（29）心（29）肾（29）大脑。缺氧可能对血脑屏障和血睾屏障有所影响,增加了藏红花酸通过这两种生物屏障的能力。