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目的:脑胶质瘤是最常见的神经上皮细胞肿瘤,由于其发病率高、预后不良,一直是基础和临床研究的热点。近年提出胶质瘤干细胞（Glioma stem cells,GSC）理论已经被大多数学者认可,理论认为胶质瘤干细胞是实体肿瘤中的小部分具备干细胞特性的“种子”,虽然胶质瘤干细胞仅占极少数,且与构成肿瘤主体的相对分化的肿瘤细胞不同,但因其干细胞特性,包括无限生长、不对称细胞分裂以及肿瘤多向分化潜能,是驱动肿瘤发生发展和侵袭迁移,以及放射治疗和药物化疗抵抗的根源。组蛋白赖氨酸甲基转移酶（Enhancer of zeste homolog 2,EZH2）基因编码的EZH2蛋白是多梳抑制复合物 2（Polycomb repressive complex 2,PRC2）的一个催化亚基,PRC2可通过EZH2使赖氨酸27上组蛋白H3（H3K27me3）的三甲基化来维持靶基因的转录抑制,从而发挥作用。EZH2过度表达已被报道在许多侵袭性肿瘤中,包括来自头颈部,皮肤,肾脏,肺,膀胱和肝脏的肿瘤,并且在这些肿瘤中,EZH2的表达增加与预后相关。本研究检测EZH2在人脑低、高级别胶质瘤组织标本中的表达差异;并研究胶质瘤干细胞中EZH2的作用,探讨EZH2对胶质瘤干细胞干细胞特征的维持以及侵袭特性的作用,了解EZH2与Notchl通路之间的相互关系,以此为理论依据发掘胶质瘤潜在的分子治疗靶点。方法:1.通过对常用肿瘤数据库基因表达交互分析（Gene Expression Profiling Interactive Analysis,GEPIA）中370例标本和中国脑胶质瘤基因组图谱（Centre for Global Geostrategic Analysis,CGGA）中228例标本的数据进行分析,了解在人脑胶质瘤组织及非瘤人脑组织中EZH2的表达情况,EZH2表达量和胶质瘤患者预后的关系以及不同WHO分级的胶质瘤中EZH2的表达情况。2.通过Western blot和定量PCR（qRT-PCR）检测本科室收集10例非瘤脑组织和33例胶质瘤组织EZH2的表达量,分析并验证EZH2表达量与胶质瘤预后的影响;3.通过EZH2干扰RNA（siRNA）靶向下调U87、SHG-140来源的胶质瘤干细胞中EZH2的表达后,检测这两种干细胞中自我更新及侵袭能力的变化;4.通过干扰RNA（siRNA）下调U87、SHG-140来源的胶质瘤干细胞中EZH2、Notch1的表达以及通过免疫共沉淀实验后,研究EZH2与Notch1通路之间的相关性;5.使用EZH2特异性甲基转移酶抑制剂GSK126抑制EZH2的表达后,验证EZH2对U87、SHG-140来源的胶质瘤干细胞中EZH2对胶质瘤干细胞自我更新、侵袭能力的影响,同时验证在胶质瘤干细胞中EZH2与Notch1通路的关系。结果:1.在GEPIA分析163例胶质母细胞瘤组织标本和207例非瘤脑组织标本中EZH2的mRNA水平。结合CGGA数据库中228例不同等级胶质瘤患者的数据,得到在人脑胶质瘤组织中EZH2的表达量明显高于非瘤脑组织,并随着WHO等级增加,EZH2的表达增高。同时胶质瘤中EZH2高表达时,胶质瘤患者的生存期较短。2.本研究对43例人脑标本（10例非瘤脑组织和33例胶质瘤组织）进行PCR和Western blot,结果显示EZH2在胶质瘤组织中比非瘤组织表达明显升高,且与胶质瘤的WHO分级呈正相关（P＜0.05）;3.通过EZH2-siRNA靶向抑制U87和SHG-140胶质瘤干细胞中的EZH2表达后,这两株胶瘤干细胞自我更新能力减低,干细胞分子标记蛋白及Notch1通路相关蛋白表达下（P＜0.05）;4.Notch1-siRNA靶向下调U87和SHG-140来源的胶质瘤干细胞中的Notch1表达后,这两株胶瘤干细胞Notch1通路相关蛋白表达下降,同时干细胞分子标记物表达下降,而EZH2蛋白及H3K27me3蛋白表达无明显下降;5.免疫共沉淀结果显示EZH2活化STAT3后作用于Notch1通路的NICD;6.EZH2特异性抑制剂GSK126处理胶质瘤干细胞后发现EZH2、H3K27me3及Notch1通路相关蛋白表达降低,同时两株干细胞系自我更新、增殖及侵袭能力下降。结论:1.在人群中,过表达EZH2与胶质瘤的发生、维持、胶质瘤WHO分级的提升以及胶质瘤患者预后不良密切相关。2.靶向下调EZH2表达可以抑制胶质瘤干细胞自我更新和侵袭能力。3.EZH2在胶质瘤干细胞可调控Notch1通路来发挥其生物学特,并且EZH2通过活化STAT3来激活Notch1通路。4.GSK126作为EZH2特异性抑制剂可以明显抑制胶质瘤干细胞的自我更新和增殖能力。