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观察5′-非编码区(5-UTR)某些位点突变对B组柯萨奇病毒(CVB)毒力和致病性的影响。方法通过对含有CVB1基因组cDNA全序列的穿梭质粒pNI4的5-UTR特定位点定点诱变，获得CVB1突变株质粒pC、pD和pE，转染HeLa细胞获得3株5-UTR变异的CVB1突变株。纯化、扩增、测定各突变株的滴度，通过细胞病变效应(CPE)比较实验、空斑形成实验、一步生长曲线及半数致死量等比较原型株和3个突变株的毒力。用这些毒株攻击新生BALB/c小鼠，观察了突变株的心肌致病性的变化。结果成功构建了3株含5-UTR突变的CVB1突变株，序列测定与定点突变设计相符。CPE比较实验表明突变株CVB1C和CVB1E的毒力均明显高于原型株(P＜0.05)，而突变株CVB1D和原型株之间的毒力没有显著性差异(P＞0.05)；空斑形成能力比较实验结果类似；一步生长曲线测定表明，与原型株CVB1N相比，CVB1D在各时间点上均较CVB1N复制的慢(P＜0.05)，而在7h时，毒株CVB1C、CVB1E均较CVB1N增长的快(P＜0.05)；LD50的测定结果表明CVB1C的毒力明显增强(P＜0.05)，而CVB1D的毒力则明显减弱(P＜0.05)，CVB1E的毒力较原型株无显著性改变(P＞0.05)。检测病毒攻击BALB/c小鼠的心肌组织，CVB1C感染的BALB/c小鼠心肌病变程度显著高于其他3个毒株组(P＜0.05)，其余3个毒株组间趋势上虽有高低，但无统计学意义(P＞0.05)。结论与原型株相比，突变株CVB1C的毒力在体内和体外实验中均明显增强，而突变株CVB1D的毒力则发生了相反的变化，突变毒株CVB1E在体内、体外的毒力改变结果不一致。结合测序、比对及RNA二级结构分析，在CVB15-UTR的nt560～nt580段形成的膨突环中含有病毒毒力的重要决定子，其中A579→G579的突变，能使CVB1的毒力明显增强，而该结构域中的多聚U具有维持膨突环结构和功能的作用，这些位点的突变将造成CVB1的毒力明显减弱。