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本研究是山西省科技攻关项目“超声和超临界耦合萃取万寿菊花中叶黄素的技术研究”的内容。主要解决叶黄素提取率、纯度和得量不高、储存稳定性差的问题。首先,建立了万寿菊花萃取物中叶黄素含量的高效液相色谱分析方法:色谱柱为Diamonsil C18柱;V (甲醇)∶V (乙腈)∶V(乙酸乙酯)∶V(水) = 30∶29∶40∶1为流动相;流速0.75mL·min-1;检测波长450nm;柱温25℃;进样量20μL。该方法最低检出限为1×10-7g·mL–1,叶黄素在0.8~24μg·mL-1范围内线性关系良好,方法精密度RSD(相对标准偏差)为0.96%,加标回收率为99. 49%~100. 2%。另外,对AOAC法做了改进:提取和皂化的过程中通入氮气,加入保护剂,用冷皂化代替热皂化,用1∶1的氧化镁和硅藻土作为柱层析的吸附剂,将叶黄素的洗脱剂调整为正己烷∶乙腈∶甲醇= 70∶25∶5 (体积比)等,使总叶黄素含量测定值增加了33.11%左右;其次,通过单因素和正交实验确定了超临界CO2萃取万寿菊花中叶黄素油树脂的最佳工艺条件:萃取压力45MPa,萃取温度50℃,分离Ⅰ压力8MPa,分离Ⅰ温度55℃,分离Ⅱ压力5 MPa,分离Ⅱ温度20℃,CO2流量18L·h-1,萃取时间3h,将此条件下萃取剩余物用超声强化溶剂萃取,超声功率450W,超声时间25min,丙酮∶石油醚=1∶1为提取溶剂,液料比25(ml/g)时,叶黄素油树脂溶量出最大,用超临界与超声耦合萃取法,使叶黄素油树脂的萃取率从原来10%左右提高到24%左右;在此基础上,研究了由万寿菊萃取物制备高纯度叶黄素的方法:将万寿菊花萃取物在异丙醇中均匀分散,用0.25倍其质量的KOH,配制饱和甲醇溶液,将这两种体系混合在65℃下皂化4h,脱除溶剂加水稀释,用二氯甲烷萃取游离叶黄素,在分出的水相中加入足量氯化钙以释放出分散在水相中的叶黄素,再对分离出的叶黄素用体积比1∶4的乙酸乙酯与石油醚混合溶剂洗涤,最后用乙醇洗涤,得到叶黄素晶体,经高效液相色谱法测定叶黄素含量在96%以上。最后,研究了制备和保存叶黄素的稳定条件:超临界萃取过程温度不宜超过55℃,皂化中温度不宜高于80℃,加碱量应为叶黄素油树脂量的1/4,N2气氛、Vc保护下,有利于叶黄素的稳定,高纯度叶黄素-20℃下真空封装于铝铂袋中,能长期稳定保存。