香蕉枯萎病菌的鉴定及其拮抗细菌的筛选

来源 :广西大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhangsiqin
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作为一种毁灭性土传的病害,由尖孢镰刀菌古巴专化型4号生理小种(Fusarium oxysprum f.sp.cubenserace4,FOC4)引起的香蕉枯萎病已在广西部分香蕉产区零星发生,正处于病原菌菌量累积阶段。目前,在香蕉枯萎病化学防治方面,并没有筛选出效果很好的药剂。采用生物防治措施可以减少农药的使用,改善农田生态系统,保持该系统的生物多样性,是一条可持续发展的道路。本研究利用尖孢镰刀菌的通用引物和FOC4特异性引物,通过PCR快速检测技术,结合序列分析,将采集自南宁和钦州的疑似枯萎病样品的病原物鉴定为FOC4。通过平板对峙试验来筛选采集自广西的发病香蕉园的土壤和香蕉根际,叶际及假茎内部的细菌,共筛选出了 30株对FOC4具有较好抑制作用菌株。通过16SrDNA序列的分析,确定它们大致分为 3种:Bacillus subtilis、Paenibacillus polymyxa、Bacillus licheniformis。通过测定其中几株抑菌活性相对稳定的菌株:J3-3、J6-1、J7-1,XJ18、XY9、XG2在NA培养液中代谢产物的抑菌活性,本试验筛选出了 XJ18、J3-3两株菌株,它们的代谢产物平板抑菌率均超过了 90%。通过16SrDNA序列分析及生理生化分析,初步鉴定它们为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis。该菌可以利用蜜二糖、棉籽糖、山梨醇、山梨糖、甘露醇、甘露糖、乳糖、D-葡萄糖、L-阿拉伯糖、D-木糖这些碳源。该菌在含4%黄豆粕和2%糖蜜的培养液培养生长良好,在15-20d时到达生长的峰值。该培养液平板抑菌效果较好,但是产生具有抑菌活性的代谢产物远低于NA培养液。在室内盆栽试验中,NA培养液与4%黄豆粕+2%糖蜜的培养液的防效无明显差异,在先处理后接种的试验组中2种培养液均取得了 40%以上的防效。
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