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猪瘟(Classical Swine Fever, CSF)是由猪瘟病毒(Classical Swine Fever Virus, CSFV)引起的猪的高度致死性、接触性传染病。本研究通过研究猪瘟慢性感染过程中的组织病理学变化以及CSFV中等致病力毒株的组织嗜性和病毒核酸载量的动态分布,揭示我国CSFV慢性感染的致病性特征,为进一步探讨CSF持续感染的致病机理提供一定的实验依据。本研究以肌肉注射的方式对11头30日龄健康断奶仔猪人工感染CSFV中等致病力毒株HeBHHl/95株(滴度为5×103.5TCID50/ml),构建猪瘟慢性动物感染模型,同时设2头阴性对照猪,感染后每天测量猪的体温并对临床症状进行打分记录。在第1dpi、3dpi、6dpi每次剖杀2头感染猪,lOdp、15dpi、25dp、35dpi、45dpi每次剖杀1头感染猪,共11头猪,采集每头猪组织器官和体外分泌物共30种,每个组织采集多个备份,一份HE染色和免疫组化实验,一份用FQ-PCR法检测组织内CSFV核酸载量,同时监测整个感染过程中外周血抗体水平的变化趋势。根据临床打分和体温变化的趋势,可以将整个慢性感染病程分成三个阶段,即潜伏期(ldpi～7dpi)、发病期(8-24dpi)、转归期(25dpi～45dpi)。潜伏期内感染猪体温正常,无明显临床症状,此时剖杀的感染猪,各器官眼观无病变；发病期体温逐渐升高至41.5℃,临床表现为精神倦怠,食欲不振,腹泻,腋下皮肤发红,淋巴结肿大。感染猪剖杀后发现全身淋巴结出血,脾脏有轻微梗死,肾脏表面有出血点。19dpi后体温开始慢慢降低,临床症状逐渐消失；转归期体温正常,食欲正常,除偶尔拉稀,未见其他发病症状。此时期感染猪剖杀后除淋巴结有轻微出血、水肿,其他器官未见病变。组织切片HE染色后发现,第3dpi,腹股沟淋巴和颌下淋巴结开始出现炎性细胞浸润,微血栓形成；脾脏小梁周围可见红细胞、炎性细胞浸润；扁桃体黏膜表面可见炎性细胞浸润,淋巴小结中淋巴细胞变性,此时其他组织未见病变。随着病程的发展,其他组织逐渐出现病变,第15dpi,所有组织均表现出不同程度的病变,主要是组织微血管出血、形成血栓以及炎性细胞浸润和组织细胞坏死。在感染后期(第35dpi和45dpi),大部分器官组织已经转归,未发现明显组织病理变化,只有免疫器官、肾脏、肝脏以及十二指肠仍可见组织病变,但病变程度明显小于发病期。以上结果说明在潜伏期时,感染猪虽然没有明显的临床症状,但部分免疫器官已经出现病变;发病期各组织器官出现典型的猪瘟组织病理变化；转归期时大部分组织都从发病期的病理状态恢复正常,但是免疫器官和部分脏器仍处于轻微病理状态。免疫器官最早出现病变,并且在整个病程中无法恢复。免疫组化结果显示,1dpi,所有组织器官均未发现CSFV阳性细胞；3dpi,脾脏、扁桃体、腹股沟淋巴结、肠系膜淋巴结、回盲瓣、回肠等组织的淋巴细胞中最先发现CSFV阳性信号；6dpi,肝脏、胃、十二指肠、胰腺、结肠、直肠、肾脏中发现CSFV阳性细胞；10dpi～45dpi,所有样本组织中均发现CSFV阳性细胞。通过免疫组化发现慢性猪瘟感染初期CSFV主要定居在外周免疫器官的淋巴细胞和单核/巨噬细胞内,再通过血液循环扩散到其他组织器官中。随着病程的发展,发病期CSFV感染细胞的类型以及阳性细胞数量明显增加,15dpi,样本组织中均发现大量CSFV阳性细胞,包括各组织细胞和淋巴细胞；转归期,CSFV感染细胞的类型未变,各组织细胞或淋巴细胞中仍可见CSFV阳性物质,但阳性细胞数量有所下降,其中免疫器官、肾脏、肝脏、胰腺等阳性细胞数量略微降低,其他组织器官阳性细胞数量降低明显。FQ-PCR结果显示,在整个慢性感染病程中,各样本组织中CSFV病毒核酸载量经过潜伏期、发病期和转归期等阶段呈现从低到高再降低的变化趋势。即从潜伏期到发病期逐渐增多,从发病期到转归期均降低,但降低幅度不尽相同,病毒核酸检测结果与免疫组化结果大致相同。CSFV中等致病力毒株对各个组织嗜性从大到小依次为脾脏、颌下淋巴结、回肠、腹股沟淋巴结、扁桃体、肠系膜淋巴结、胰腺、肾脏、皮肤、肺脏、回盲瓣、空肠、肝脏、食道、胃、结肠、睾丸、十二指肠、膀胱、直肠、心肌、脊髓、肌肉、大脑。同时从尿液、粪便、唾液中检测出CSFV,反应出慢性猪瘟体外排毒,是重要CSFV传染源。在整个感染过程中,猪瘟病毒的抗体水平均呈阴性。综上所述,由中等致病力毒株建立的猪瘟慢性感染,从潜伏期到发病期,随着各组织病毒载量的提高,临床症状和组织病理学变化逐渐加重；。经过毒株与宿主之间的相互作用,病毒在病程中逐渐适应机体；在转归期,病毒与组织细胞共生,临床症状逐渐消失,除免疫器官和少数组织器官仍有轻微病变,大部分组织恢复正常,但整个感染过程中,猪瘟病毒抗体水平均为阴性。在整个猪瘟慢性病程中,临床表现、病理变化和免疫组化研究及病毒载量监测均表现出一致性,体现了CSFV中等致病力毒株的致病性特征：对淋巴器官具有持续性的、不可恢复性的损伤,对其他组织的损伤具有可恢复性。因而使感染猪变成具有一定程度免疫功能障碍而不表现出临床症状的慢性带毒猪。