高温菌株生理生化及有机物降解性质研究

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高温菌具有独特的基因类型和生理机制,高温菌降解酶具有代谢效率高,耐高温、酸、碱、有毒有害物质等性质,受到广泛关注。但由于对高温菌生物转化及代谢调控理论研究的不足,限制了高温菌对餐厨垃圾降解转化效率的提高和技术的完善。本文以课题组自行分离的高温菌株为研究对象,主要研究4株具有广谱性降解功能的高温菌株及4株高温纤维素降解菌株的生理生化性质及有机物降解性能,初步构建了具有广谱性降解功能的高温菌复合系,以期进一步研究复合菌株间协同产酶机制及代谢调控。结论如下:(1)对分离自65℃具有广谱降解性能的4株菌株Y5、Y6、L3和L5进行生理生化性质研究。结果表明,Y5、L3株菌为杆菌,无运动性,兼性厌氧,有荚膜,革兰氏阴性,有芽孢;Y6、L5株菌为杆菌,无运动性,兼性厌氧,有荚膜,革兰氏阳性,有芽孢;Y5、Y6、L3能产生接触酶,不能产生氧化酶,L5能产生接触酶和氧化酶,适温度范围60℃-65℃,最适pH范围为6.0-9.0,均可利用葡萄糖、果糖、海藻糖以及可溶性淀粉,不可利用CMC-Na、乳糖、甘露醇。其中Y5、L3、L5能利用蔗糖而Y6不能利用蔗糖。经16SrDNA序列分析,将这4株菌株初步鉴定为地芽孢杆菌属(Geobacillus sp.)。(2)研究从70℃下分离得到的4株纤维素降解菌株C1、C2、C3和C4的生理生化性质。菌株C1、C2、C3和C4分别为G-杆菌(有芽孢)、G+杆菌(有芽孢)、G+杆菌(有芽孢)、G+无芽孢杆菌。四株菌均为不运动、好氧、能产生接触酶、能产生氧化酶。其中,C1和C2的接触酶活性大于C3和C4。四株菌都能产生纤维素酶,C3和C4分解纤维的能力相对C1和C2较强。C1与C2之间,C1与C3之间,C1、C2和C3之间以及4菌株之间都具有协同作用。C3分解纤维素的延时期相对其他三株菌长,但其在以纤维素为唯一碳源的液体培养基中生存能力最强。(3)初步进行了广谱性嗜热菌复合系的构建,主要设置A、B、C、D、E、F、G及A-1共8组。通过前期驯化,各组的淀粉降解效果:F组>E组>A组>A-1组;滤纸降解效果:F组>E组>A-1组>A组;蛋白质降解效果:E组>F组>A组>A-1组,其中E组蛋白质降解效率最高。而油脂在高温条件下乳化使得测定的吸光度值不减反而增加,对复合系油脂降解能力的评价造成很大影响。关于高温对油脂的降解影响需在今后的实验中有待进一步研究。
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