【摘 要】
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本研究目的是进化筛选与B淋巴细胞活化因子特异结合的单链DNA适体并鉴定其结合力。应用指数方式富集的配体系统进化(SELEX)技术,将随机寡核苷酸文库与B淋巴细胞活化因子相互
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本研究目的是进化筛选与B淋巴细胞活化因子特异结合的单链DNA适体并鉴定其结合力。应用指数方式富集的配体系统进化(SELEX)技术,将随机寡核苷酸文库与B淋巴细胞活化因子相互作用,分离出结合的寡核苷酸配体,优化对称和非对称PCR实验条件,成功进行了13轮次进化筛选,并将进化产物克隆,随机选取42个阳性克隆测序,对测得的41序列根据同源性分为6类不同序列,应用斑点印迹法证实6类序列均与B淋巴细胞活化因子相结合;酶联法比较各适体序列对B淋巴细胞活化因子的相对结合力,对光密度值进行统计学分析,以序列44光密度值0.752最高(p<0.05),具有对B淋巴细胞活化因子相对最高结合力。本研究首次成功获得特异结合B淋巴细胞活化因子的单链DNA适体,为研发自身免疫病和肿瘤诊治新药物奠定了基础。
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