榆耳多糖的分离纯化及活性研究

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本文研究了榆耳多糖最佳的分离纯化工艺,获得一个榆耳多糖均一组分GI-Ⅱc,并对其理化性质及单糖组成进行了初步鉴定,确定其具有较高抗氧化活性。利用水提醇沉法提取榆耳粗多糖,选择70%醇沉粗多糖GⅠ-Ⅱ为研究目标,得率2.61%。正交试验确定Sevag法除蛋白最佳条件为:样品与有机溶剂的体积比为3:1,氯仿与正丁醇的体积比为5:1,震荡时间为15min,萃取次数为2次。AB-8大孔树脂吸附法确定GⅠ-Ⅱ最佳脱色工艺条件为:AB-8大孔树脂添加量为0.2g/mL,pH为4.0,脱色温度为60℃。GⅠ-Ⅱ经DEAE-cellulose 52阴离子交换层析分离共获得三个组分GⅠ-Ⅱa、GⅠ-Ⅱb、GⅠ-Ⅱc,其中GⅠ-Ⅱc纯度鉴定初步确定其为均一多糖,纯度达到95.2%。对GⅠ-Ⅱa、GⅠ-Ⅱb、GⅠ-Ⅱc的理化性质研究表明三个组分均为非淀粉多糖,几乎不含有多酚、蛋白以及核酸类物质;红外光谱分析显示GⅠ-Ⅱa、GⅠ-Ⅱb、GⅠ-Ⅱc均具有明显的多糖特征峰,且存在吡喃型糖苷键结构;GⅠ-Ⅱc中存在酰胺基结构,可能含有少量结合蛋白。薄层层析鉴定GⅠ-Ⅱa、GⅠ-Ⅱb的单糖组成均为葡萄糖、半乳糖、木糖和甘露糖;而GⅠ-Ⅱc可能仅由葡萄糖组成。体外抗氧化活性试验结果表明,GⅠ-Ⅱ具有较好的抗氧化活性,表现出较强的还原力和对羟基自由基以及DPPH自由基的清除能力。0.1mg/mL的GⅠ-Ⅱ还原力相当于同剂量Vc的75%;对羟基自由基的清除作用明显,ⅠC50=0.124mg/mL,已超过Vc的清除能力;对DPPH自由基同样具有很好的清除效果,ⅠC50=58.82 μg/mL。但对超氧阴离子的清除作用不理想。榆耳多糖GⅠ-Ⅱa,GⅠ-Ⅱb,GⅠ-Ⅱc三个组分中,GⅠ-Ⅱc为具有较高抗氧化活性的活性多糖。抑菌试验表明,榆耳中含有的抑菌物质不是大分子量的多糖类物质。
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