乙酰转移酶活性的电化学发光分析

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在诸多翻译后修饰过程中,组蛋白乙酰转移酶(HATs)催化引起的组蛋白的乙酰化是其中的一个至关重要的监管与监控机制,这个机制不仅有效地控制着染色质的结构和转录状态,而且它在生命体的基本生物过程,比如:DNA的复制与修复,基因组的稳定性,组蛋白沉积与营养代谢中都扮演着不可或缺的角色。目前为止,已经有许多研究表明组蛋白乙酰转移酶的活性与人类频发疾病,比如癌症,神经系统疾病,艾滋病感染和炎症等的发病机理密切相关,而且组蛋白乙酰转移酶已经成为这些疾病监测与监控的重要生物标志物,基于组蛋白乙酰转移酶的抑制剂也在化疗和抗癌过程中发挥着重要作用。因此组蛋白乙酰转移酶活性检测对于临床化学治疗、生物医药和生化研究都具有重要意义。电化学发光生物传感器有高灵敏度、仪器简单并且易操作、检测速度快、容易控制等多种无与伦比的优点,近年来在临床检测和生物分析领域已受到广泛的关注。随着各种各样的信号放大手段和信号转换机制的发展,本工作研究了高效电化学发光信号放大技术并设计出传感器,发展了高效组蛋白乙酰转移酶活性分析方法,并成功应用于其药物抑制剂的筛选。利用DNA杂交链反应形成的超级三明治结构稳固的银纳米簇作为电化学发光信号探针,并用于组蛋白乙酰转移酶活性检测。该传感器展现出快速响应分析和高灵敏度的优点,并将该传感器成功用于组蛋白乙酰转移酶抑制剂的筛选,甚至在复杂生物细胞裂解液中也可以进行高效的组蛋白乙酰转移酶的检测。设计了基于鞣酸具有的类超氧化物歧化酶特性的turn-off型电化学发光生物传感器,在这一策略中,鞣酸组装探针可以消除引起鲁米诺电化学发光所需要的超氧自由基从而降低电化学发光信号,并成功应用于组蛋白乙酰转移酶活性的分析。该传感器还可进一步应用于细胞裂解液中组蛋白乙酰转移酶的酶活检测。
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