目的:探索两种不同胰腺癌细胞株(PaTu8988和BxPC-3)来源的外泌体对肿瘤微环境中肿瘤相关成纤维细胞的作用。探讨肿瘤相关成纤维细胞在细胞的增殖、迁移中的影响,并对胰腺癌来源的外泌体促进肿瘤相关成纤维细胞活化的可能机制作出探讨。方法:1.收集两种不同胰腺癌细胞株(PaTu8988和BxPC-3)上清培养液提取外泌体。2.透射电镜、纳米颗粒分析追踪技术(NTA)、蛋白免疫印迹法等方法鉴定提取的胰腺癌源性外泌体。3.将提取的胰腺癌源性外泌体与肝星状细胞(LX-2)共培养后,用蛋白免疫印迹法测定与肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)有关的蛋白表达水平。4.CCK8细胞增殖实验及划痕实验用于检测胰腺癌源性外泌体促进CAFs的活化在细胞增殖及迁移中的作用。5.蛋白免疫印迹法检测胰腺癌源性外泌体促进CAFs的活化与NF-κB通路的相关蛋白的表达水平。结果:1.透射电镜、纳米颗粒分析追踪技术(NTA)、蛋白免疫印迹法鉴定用两种胰腺癌细胞株上清培养液提取的外泌体。2.将提取的胰腺癌源性外泌体与肝星状细胞(LX-2)共培养后用蛋白免疫印迹法测定发现CAFs相关的标记物α-SMA蛋白表达水平增高。3.用提取的胰腺癌源性外泌体和肝星状细胞(LX-2)共培养后细胞的增殖及迁移能力增强,NF-κB通路中的p-NF-κB蛋白表达上升,NF-κB蛋白表达无明显变化;而p-IκBα和IκBα的表达量下降,其中以p-IκBα下降更明显。结论:胰腺癌来源的外泌体可以促进CAFs的活化,从而促进细胞的增殖、迁移。该现象可能通过NF-κB通路调控实现。