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目的本研究目的在于,检测中药复方二仙丸对引起头皮屑的马拉色菌的抑制作用以及对被脂多糖诱导的人永生化角质形成细胞(HaCaT)的作用,验证二仙丸是否具有抑制马拉色菌生长的作用；同时也验证二仙丸是否对HaCaT有毒副作用,是否具有较高的安全性。为生产含中药复方成分的去屑护发产品提供功效性与安全性的实验依据。方法先用10倍量,60%乙醇回流提取当归、侧柏叶、苦参、白鲜皮2h,重复3次,合并滤液,离心过滤后运用旋转蒸发法,回收乙醇制成流浸膏,用培养基稀释成相应药液浓度。将实验组分为中药药液组：苦参、白鲜皮、当归、侧柏叶、二仙丸(当归+侧柏叶)、二仙丸+苦参、二仙丸+白鲜皮、四药混合(二仙丸+苦参+白鲜皮)；标准品药液组：苦参碱、氧化苦参碱、白鲜碱、阿魏酸、槲皮素；阳性药液组：吡啶硫酮锌(Zinc Pyrithione, ZPT)。再采用液体药基法,用含药培养基(中药药液组的终浓度为0.977mg/mL-1000mg/mL;中药单体药液组的终浓度为4.883×10-4mg/mL～0.5mg/mL; ZPT药液组的终浓度为2.441×10-2μg/mL～25μg/mL.培养(0.5～1.0)×108CFU/mL的球形马拉色菌(Malassezia globosa, M.globosa)、糠秕马拉色菌(Malassezia furfur, M. furfur)、合轴马拉色菌(Malassezia sympodialis, M. sympodialis)、钝形马拉色菌(Malassezia obtuse, M. obtuse),与生长对照组进行对比,以生长被抑制80%的最小药液浓度判定为最小抑制浓度(Minimum Inhibitory Concentration, MIC)。最后采用四噻唑蓝(Methyl Tiazolyl Tetrazolium, MTT)检测法与台盼蓝(Trypan Blue, TB)染色法,检测用含药培养基(中药药液组的终浓度200mg/mL(高浓度)、20mg/mL (中浓度)、2mg/mL(低浓度)；中药单体药液组的终浓度为5×10-2mg/mL (高浓度)、5×10-3mg/mL(中浓度)、5×10mg/mL(低浓度)；ZPT药液组的终浓度为0.2%(高浓度)、2×101%(中浓度)、2×101%(低浓度))培养HaCaT的细胞存活率(Cell viability, CV)。成果各组药液对马拉色菌的MIC值或相对最小抑菌浓度(Relativeminimum Inhibitory Concentration, RMIC)值从小到大排列为：ZPT(1.2×10-3mg/mL)、白鲜碱(MIC:0.2mg/mL, RMIC:43.2mg/mL)、苦参碱(MIC:0.5mg/mL,RMIC:74.5mg/mL)、苦参(MIC:114.9mg/mL)、侧柏叶(MIC:119. lmg/mL)、氧化苦参碱(MIC:lmg/mL, RMIC)、二仙丸(MIC:182.4mg/mL)、四药混合(MIC:193.7mg/mL)、白鲜皮(MIC:240.3mg/mL)、二仙丸+苦参(MIC:242.2mg/mL)、苦参+白鲜皮(MIC:248.7mg/mL)、二仙丸+白鲜皮(MIC:319.Omg/mL)、槲皮素(MIC:0.4mg/mL, RMIC:391.4mg/mL)、当归(MIC:768.8mg/mL)、阿魏酸(MIC:0.5mg/mL, RMIC:1042.2mg/mL)。当归组、阿魏酸组和槲皮素组MIC或相对MIC值大于其他各组,P<0.05,差异有统计学意义。MTT法与TB法均测出有效的实验组为：二仙丸(2mg/mL)、槲皮素(0.005mg/mL)、阿魏酸(0.5mg/mL)、苦参碱(0.5mg/mL)。MTT法中,测出对HaCaT有细胞毒性的实验组为：3级毒性：ZPT (0.2%)、ZPT (2%); TB法中,测出对HaCaT有细胞毒性的实验组为：5级毒性：ZPT(2%)、白鲜皮(200mg/mL)、侧伯叶(20mg/mL)、侧伯叶(200mg/mL)、四药混合(200mg/mL),3级毒性：ZPT(0.2%)、二仙丸(20mg/mL)、二仙丸(200mg/mL)、四药混合(20mg/mL)。MTT法与TB法均测出对HaCaT有细胞毒性的实验组为：ZPT(0.2%)、ZPT(2%)；其他中药药液组和中药单体药液组药液均没测出对HaCaT有细胞毒性。结论①二仙丸与ZPT都能有效抑制马拉色菌的生长增殖,但二仙丸的安全性比ZPT高。②中药药液组中,二仙丸的MIC值最小,只有二仙丸(2mg/mL)能有效抑制角HaCaT的炎症反应,因此,二仙丸比本研究中的其他中药药液更能有效地去屑。③中药单体中,阿魏酸、苦参碱在0.5mg/mL时既能抗马拉色菌的生长增殖,又能抑制角HaCaT炎症反应,对HaCaT无细胞毒性。苦参碱比二仙丸更能有效抑制马拉色菌的生长增殖,但二仙丸在抑制角质形成细胞炎症反应的能力比苦参碱强。阿魏酸在抗马拉色菌生长增殖与抑制HaCaT的炎症反应的能力都比二仙丸的差。