【摘 要】
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对一株青霉M501的液体发酵培养基成分和配比以及该酶的发酵条件进行研究,结果表明:(1)该菌株最适液体发酵培养基组成为:酵粉1.0﹪,可溶性淀粉4﹪,NHNO0.5﹪,KC10.05﹪,MgSO0.05﹪,MSO0.
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对一株青霉M501的液体发酵培养基成分和配比以及该酶的发酵条件进行研究,结果表明:(1)该菌株最适液体发酵培养基组成为:酵粉1.0﹪,可溶性淀粉4﹪,NH<,4>NO<,3>0.5﹪,KC10.05﹪,MgSO<,4>0.05﹪,M<,n>SO<,4>0.001﹪,FeSO<,4>0.001﹪,PH5.5.(2)最适发酵条件为:种龄24hr,接种量6﹪,装液量100ml/500ml三角瓶,初始PH5.5,30℃,摇床转速为80tr/min,发酵周期72hr.通过优化,该菌产酶周期缩短了约10hr,酶活基本可以稳定在1500U/ml,比优化前酶活提高了1.5倍左右.青霉M501所产植酸酶经过二级硫酸铵沉淀浓缩,在PH8.0条件下依次进行Sephadex G-100凝胶层析,一次DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析,二次DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换层析,最终经过SDS-PAGE得到有酶活的单带.对该酶部分性质进行研究发现:该酶在PH2-PH12和37℃-70℃性质稳定,在PH2.5和PH5.5各有一个酶活峰值;在37℃的酶活仅次于50℃时的最大酶活峰值.酶与底物反应时间在10min-30min稳定.在4℃冰箱长时间保存,比较稳定.Ca<2+>和Fe<2+>对该酶酶活有很强的促进作用,浓度在1mM时酶活达到最高值;Zn<2+>,Cu<2+>,Li<+>对酶活有抑制作用.初步推测该酶蛋白是单组份,其作用位点与Ca<2+>和Fe<2+>结合的双结构域的蛋白质分子,分子量约为66200Dal.
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