目的:建立基于抗内毒素作用的板蓝根质量控制的生物检定方法。　　 方法:通过化学质量控制确保板蓝根药材质量的稳定性；采用动态浊度法定量检测板蓝根体外抗内毒素活性，以量反应平行线进行生物检定统计分析，计算各产地药材生物效价。　　 (1)在化学质量研究中：运用薄层色谱法对板蓝根药材中的精氨酸、(R，S)-告依春、苯甲酸和水杨酸进行定性鉴别；运用HPLC色谱法对板蓝根药材中的苯甲酸、水杨酸和(R，S)-告依春进行含量测定检查，以保证板蓝根药材质量的稳定性。　　 (2)在板蓝根生物检定研究中，对动态浊度法方法学进行考察和可靠性验证，以确定检测方法和标准；运用动态浊度法比较热压灭菌、活性炭吸附、微孔滤膜、超滤和微波等几种方法清除内毒素的效率；对文献中已报道具有抗内毒素作用的板蓝根中的3中有机酸：苯甲酸、水杨酸和丁香酸进行抗内毒素量效关系考察；在水提醇沉、正丁醇、氯仿和乙酸乙酯4个部位中筛选板蓝根抗内毒素有效部位，并确定有效部位的抗内毒素作用关系；按照生物检定的方法和原则，考察阳性对照药多粘菌素B的抗内毒素作用关系；根据量反应平行线原理，使用多粘菌素B对对照药材进行抗内毒素效价标定；根据同质性要求，运用板蓝根对照药材标定其余板蓝根药材的效价和可信限率。　　 (3)采用HPLC色谱法建立板蓝根氯仿部位指纹图谱，并运用多元线性回归分析等统计方法，将板蓝根抗内毒素效价U和抗内毒素强度的IC50与HPLC指纹图谱共有峰标准化峰面积比值相关联。　　 (4)通过家兔热原法，以最大温差和体温反应指数TRI4来考察板蓝根高、中、低剂量组对内毒素致热的家兔体温变化的影响。　　 结果:　　 (1)各产地板蓝根药材薄层检识中，均能检出精氨酸、苯甲酸和水杨酸的斑点；部分药材可以检出(R，S)-告依春斑点。板蓝根化学成分含量测定的结果：苯甲酸的含量在24.67～176.24μg·g-1之间，RSD=60.5％(n=9)；水杨酸的含量在11.87～101.76μg·g-1之间，RSD=82.6％(n=9)；(R，S)-告依春的含量在0.084～0.2633％之间，RSD=50.6％(n=10)。　　 (2)动态浊度法标准曲线方程为：lgT=2.9884-0.2842 lgC，内毒素标准品在0.1～10.0 EU·mL-1间线性关系良好，相关系数为-0.9986。在不同除内毒素方法的考察中，活性炭和超滤法的清除率效果最好，分别在99％和93％以上。有机酸对内毒素的破坏作用随着浓度的增加而增强，并且呈现指数关系，3种有机酸在相同浓度下，对内毒素的破坏作用依次为：丁香酸>苯甲酸>水杨酸。板蓝根4种不同极性萃取部位中，氯仿部位在5倍稀释时的回收率为97.3％，干扰稀释倍数最小，抗内毒素作用最强，IC50=0.268 g·mL-1。其对内毒素的破坏作用随着浓度的增加而增强，并且呈现指数关系，破坏率=55.119lgC+81.604，r=0.9605。板蓝根对照药材Sl的氯仿萃取物和多粘菌素B抗内毒素的反应率与剂量对数之间都呈良好的线性关系，并具有很好的平行性，对照药材S1相对于多粘菌素B的平行化系数tk为1.6186小于t0.05(2.306)，说明可以采用生物检定中的“量反应平行线测定”法进行效价测定。以阳性药多粘菌素B标定板板蓝根对照药材S1氯仿萃取物的抗内毒素效价，则S1浓度为0.95g·mL-1时的效价与6.25μ g·mL-1多粘菌素B相当。用S1来标定其他批次板蓝根药材，抗内毒素效价从55.83～100 U·g-1，RSD=16.8％(n=10)；可信限率从9.22～18.42，RSD=20.4％(n=9)。　　 (3)板蓝根氯仿部位指纹图谱中，10批药材中含有苯甲酸、水杨酸和靛玉红，而且10批药材的相似度都在0.9以上，RSD为2.92％<3％。通过多元线性回归分析，IC50和抗内毒素效价U相对于色谱峰的标准化峰面积比值的线性回归结果相关性趋同，其中呈正相关的色谱峰为3，8和9号色谱峰，其中3号峰为苯甲酸。　　 (4)板蓝根氯仿萃取物对内毒素致家兔发热影响的结果显示，与模型组比较，板蓝根氯仿萃取物各剂量组能够抑制TRI4的升高，并能够显著降低最大致热温差，从而降低内毒素对家兔的致热作用。从发热抑制率看，体现出了一定的剂量相关性，抑制活性强度为高剂量>中剂量>低剂量。在与阿司匹林组比较中，板蓝根氯仿萃取物各剂量组在抑制TRI4的升高和降低最大致热温差上都有显著性差异，作用没有阿司匹林强。　　 结论:实验中收集的板蓝根药材的化学质量控制合格，质量稳定可靠；通过HPLC指纹图谱多元线性回归分析和体内外抗内毒素实验的验证，建立了基于抗内毒素实验的板蓝根氯仿萃取部位的生物检定研究方法，所建立的生物效价检测方法可以作为板蓝根品质生物评价的方法之一。