甜菜M14品系具有无融合生殖特性。为了研究甜菜M14品系特异表达基因M14-263和M14-341编码蛋白的性质，为进一步将两基因转化入模式植物奠定基础，解开基因M14-263和M14-344的功能之谜，本实验以pET-28a为基础载体，利用E.coli BL21(DE3)表达体系，将甜菜M14品系表达基因M14263和M14-341的cDNA全长分别重组于原核表达载体pET-28a，成功建立了甜菜M14品系特异表达基因M14-263和M14-341的原核表达体系。经SDS-PAGE凝胶电泳及Western印迹检测表明，两个融合蛋白正确表达，其中M14-263融合蛋白的分子量约为26kD，M14-341融合蛋白分子量约为36kD。 为了优化融合蛋白表达条件，提高蛋白表达量，本实验选择可能影响蛋白表达的四个因素(培养时间、IPTG浓度、诱导时间、诱导温度)作为研究对象，设计了四因素三水平正交实验。极差和方差分析结果显示：影响融合蛋白M14-263表达条件的关键因子为诱导时间，培养时间和诱导温度对M14-263蛋白表达量有一定的影响作用，而IPTG浓度的影响效果不显著；影响融合蛋白M14-341表达条件的关键因子为诱导温度，诱导时间和IPTG浓度的影响次之，培养时间的影响不显著。实验结果表明，融合蛋白M14-263的最优表达条件为：IPTG浓度1.2mmol／L，培养时间3h，诱导时间6h，诱导温度37℃，此条件下获得的融合蛋白M14-263占菌体总蛋白的百分比高达33.2％，融合蛋白M14-263浓度为401.9mg/L；融合蛋白M14-341的最优表达条件为：IPTG浓度0.8mmol／L，培养时间3h，诱导时间7h，诱导温度28℃，此条件下获得的融合蛋白M14-341占菌体总蛋白的百分比较优化前显著提高，达16.1％，融合蛋白M14-341浓度为70.98mg/L。 热稳定性研究结果表明，M14-263融合蛋白和M14-341融合蛋白均较稳定。亲水性研究结果表明，M14-263融合蛋白较亲水，与前期生物信息学预测结果一致，但M14-341融合蛋白在前期生物信息学预测中呈疏水性，在本实验中则表现出很强的亲水性，可能是由于蛋白折叠后含有多个亲水的α螺旋，或者由于附加序列的作用导致其具有亲水性。