高压结合热处理对橡胶籽β-葡萄糖苷酶活性的影响

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橡胶籽是一种具有潜在经济价值的热带作物资源,其内含丰富的营养物质,如不饱和脂肪酸、维生素、酶类等。同时,橡胶籽中含有的氰化物、脂类等成分却增加了橡胶籽的不稳定性。为了充分利用这一资源,本文研究了经高温高压处理后橡胶籽β-葡萄糖苷酶在不同状态的稳定性情况,以及热处理对β-葡萄糖苷酶溶液的影响,并初步探究了添加不同保护剂后β-葡萄糖苷酶溶液热稳定性的作用机理。主要研究结果如下:高压结合热处理后橡胶籽β-葡萄糖苷酶在各种状态下的稳定性差异较大。其中在极端的温度环境下,橡胶籽粉β-葡萄糖苷酶稳定性依然很高;脱脂橡胶籽粉β-葡萄糖苷酶稳定性为先上升后下降趋势;原粗酶液粉β-葡萄糖苷酶稳定性下降趋势最为明显,褐变显著;粗酶液粉β-葡萄糖苷酶稳定性略高于原粗酶液粉,同样在一定温度压力作用后产生褐变。β-葡萄糖苷酶溶液的热稳定性在60 ℃及以下温度条件下较为稳定,当处理温度从62 ℃增加到64 ℃时,失活效果明显增强;68 ℃处理10 min后,β-葡萄糖苷酶活性残存率仅为5.36%;当处理温度加到72 ℃时,失活效果更加显著,仅处理4 min后,β-葡萄糖苷酶活性残存率≤1%。结果表明,β-葡萄糖苷酶热处理失活效果显著。在不同浓度的保护剂作用下,β-葡萄糖苷酶溶液的热稳定性均有提高。本论文探讨了甘油、山梨醇、甘露醇、木糖醇、赤藓糖醇对橡胶籽β-葡萄糖苷酶溶液的热稳定性的影响,并对它们的作用效果进行比较。研究表明,多元醇可以大幅提高β-葡萄糖苷酶溶液的热稳定性,其中山梨醇、木糖醇的效果最佳,甘油的效果最差。此外,各保护剂达到最佳保护效果所需的浓度也有差别。对酶构象的荧光光谱分析表明,添加保护剂的β-葡萄糖苷酶的λmax,与未添加保护剂直接加热的酶液相比,均发生一定程度的蓝移。
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