【摘 要】
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第一部分 LncRNAGHET1在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其与临床病理学关系的研究目的:研究LncRNAGHET1在甲状腺乳头状癌组织中的表达特点并分析其与甲状腺乳头状癌患者临床病理特征之间的关系。方法:应用RT-qPCR（实时荧光定量PCR）法检测51例甲状腺乳头状癌组织及其对应癌旁组织中LncRNAGHET1表达情况,并研究LncRNA GHET1的表达情况与甲状腺乳头状癌患者临床病理参数
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第一部分 LncRNAGHET1在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其与临床病理学关系的研究目的:研究LncRNAGHET1在甲状腺乳头状癌组织中的表达特点并分析其与甲状腺乳头状癌患者临床病理特征之间的关系。方法:应用RT-qPCR（实时荧光定量PCR）法检测51例甲状腺乳头状癌组织及其对应癌旁组织中LncRNAGHET1表达情况,并研究LncRNA GHET1的表达情况与甲状腺乳头状癌患者临床病理参数间的相关性。结果:RT-qPCR数据显示,51例甲状腺乳头状癌组织中,LncRNA GHET1表达明显上调,且差异具有统计学意义（P＜0.05）。LncRNA GHET1的表达与性别（P＜0.05）、肿瘤TNM分期（P＜0.05）、淋巴结转移（P＜0.05）密切相关。结论:与对应的甲状腺乳头状癌癌旁组织相比,甲状腺乳头状癌组织LncRNAGHET1表达显著升高,其高表达常见于女性,与患者TNM分期高以及淋巴结转移阳性的患者。第二部分 LncRNA GHET1对甲状腺乳头状癌细胞生物学特性影响的研究目的:过表达或敲低LncRNAGHET1后,观察LncRNAGHET1对甲状腺乳头状癌细胞增殖、迁移侵袭及凋亡能力的影响,并研究作用的机制。方法:1.应用RT-qPCR检测甲状腺乳头状癌细胞系BCPAP、TPC-1及人正常甲状腺滤泡细胞Nthy-ori3-1中LncRNA GHET1的表达水平。2.应用CCK-8实验、克隆形成法实验、细胞划痕愈合实验、Transwell实验、流式细胞技术检测敲低或过表达LncRNA GHET1后对甲状腺乳头状癌细胞增殖、迁移侵袭以及凋亡能力的影响。3.应用Western blot实验检测过表达或敲低LncRNA GHET1后对细胞凋亡及上皮-间充质转化相关蛋白表达水平的影响。结果:1.RT-qPCR数据显示,在甲状腺乳头状癌细胞BCPAP、TPC-1细胞株中LncRNA GHET 1表达水平均高于在正常甲状腺滤泡上皮Nthy-ori3-1细胞株中的表达水平,且差异具有统计学意义（P＜0.05）。2.克隆形成实验及CCK-8实验数据均显示,LncRNA GHET 1可以促进甲状腺乳头状癌细胞的增殖能力（P＜0.05）;Transwell细胞迁移实验与细胞划痕愈合实验数据显示,LncRNA GHET1可以促进甲状腺乳头状癌细胞迁移能力（P＜0.05）;Transwell细胞侵袭实验数据显示,LncRNA GHET1能够促进甲状腺乳头状癌细胞的侵袭能力（P＜0.05）;流式细胞凋亡及细胞周期实验数据显示,LncRNA GHET 1可以抑制甲状腺乳头状癌细胞的凋亡能力（P＜0.05）。3.Western blot实验数据显示,敲低LncRNA GHET1后,甲状腺乳头状癌细胞凋亡及上皮-间充质转化相关蛋白E-Cadherin表达增高（P＜0.01）,N-Cadherin（P＜0.05）和Vimentin（P＜0.01）蛋白表达水平降低。而过表达LncRNA GHET1后,甲状腺乳头状癌细胞凋亡及上皮-间充质转化相关蛋白E-Cadherin表达降低（P＜0.01）,N-Cadherin（P＜0.01）和Vimentin（P＜0.01）蛋白表达水平增高。敲低LncRNAGHET1的表达后,与对照组相比,Bax表达增加（P＜0.01）,Bcl-2的表达降低（P＜0.01）。相反,过表达LncRNAGHET1的表达后,与对照组相比,Bax的表达降低（P＜0.05）,Bcl-2 的表达增加（P＜0.05）。结论:LncRNAGHET1可以促进甲状腺乳头状癌细胞的增殖、侵袭及迁移能力,并可以抑制凋亡。第三部分 LncRNA GHET1对裸鼠体内甲状腺乳头状癌细胞成瘤生长的影响目的:研究抑制LncRNAGHET1对裸鼠体内甲状腺乳头状癌移植瘤生长的影响。方法:1.选用甲状腺乳头状癌细胞株BCPAP,构建敲低LncRNA GHET1基因的细胞株,构建甲状腺乳头状癌移植瘤模型。2.将敲低LncRNA GHET1组和对照组细胞注入裸鼠体内,观察移植瘤的生长,按时间测量并记录移植肿瘤体积和重量。结果:裸鼠移植瘤实验数据显示,敲低LncRNAGHET1组中裸鼠皮下移植瘤的重量和体积均降低（P＜0.05）。结论:敲低LncRNAGHET1,可以抑制裸鼠体内甲状腺乳头状癌移植瘤的生长。
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