艾灸对实验性RA家兔滑膜HIF-1α/VEGF的调节作用研究

来源 :成都中医药大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:csy355
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目的:观察艾灸对实验性RA家兔滑膜中细胞因子白细胞介素-6(IL-6),白细胞介素-1p(IL-1p),肿瘤坏死因子-α (TNF-α),缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)含量的影响;观察艾灸对HIF-1α/VEGF通路的调控;探讨艾灸治疗RA机理。方法:健康日本大耳白兔(以下简称“家兔”)30只,雌雄各半,体重2.5±0.25kg。造模前适应性驯养一周。随机分为空白对照组(以下简称“空白组”),RA模型组(以下简称“模型组”)和艾灸治疗组(以下简称“艾灸组”),每组10只。模型组和艾灸组用弗氏完全佐剂法造模,剂量0.5mL/kg。空白组不做任何处理。艾灸组家兔于造模后第7天开始,艾炷灸双侧“肾俞”(BL23)“足三里”(ST36)各5壮,每日1次,6天为1个疗程,共治疗3个疗程,疗程间休息一天。模型组和空白组家兔不做治疗。分别于造模前后及每个疗程结束后测量家兔双侧后膝关节周长。治疗后21天,处死动物,取膝关节滑膜组织和滑膜液,采用HE染色法,切片光镜下观察滑膜组织病理形态变化,并根据滑膜组织病变程度分级标准对滑膜组织进行病理评分。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法,检测三组家兔滑膜组织中HIF-1α, VEGF蛋白基因表达。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组家兔滑膜液IL-6, IL-1β, TNF-α含量。结果:1.与空白组比较,造模后模型组和艾灸组家兔膝关节周长显著增加(P<0.01);艾灸治疗后,艾灸组家兔膝关节周长较模型组有明显下降(P<0.01)。2.与空白组比较,模型组家兔滑膜组织水肿,充血,滑膜细胞增生呈多层,小血管增生,可见许多血管翳,较多炎性细胞浸润。滑膜病理评分显著升高;艾灸组相对于模型组,水肿程度下降,小血管增生减少,血管翳生成减少,滑膜细胞增生有所缓解。病理评分下降。3.与空白组比较,模型组和艾灸组家兔滑膜液IL-6, IL-1β, TNF-α的含量显著增加(P<0.01);艾灸治疗后,艾灸组家兔滑膜液IL-6、IL-1β、TNF-α的含量较模型组显著降低(P<0.05)。4.与空白组比较,模型组和艾灸组家兔滑膜组织HIF-1α、VEGF蛋白基因表达显著增高(P<0.01)艾灸治疗后,艾灸组家兔滑膜组织HIF-1α、VEGF蛋白基因含量较模型组显著下降(P<0.05)。结论:1.艾灸“肾俞”“足三里”能明显减轻家兔膝关节肿胀度,降低家兔膝关节周长,降低滑膜组织炎性细胞的表达,减轻滑膜细胞炎性增生,减轻组织水肿,能缓解滑膜炎症。2.艾灸能降低细胞因子IL-6.IL-1β、TNF-α含量,表明艾灸对RA具有抗炎效应。3.细胞因子IL-6、IL-1β、TNF-α在HIF-1α/VEGF通路中扮演重要角色。4.艾灸可通过降低家兔滑膜中HIF.1α和VEGF含量,抑制HIF-1α/VEGF通路活性,抑制血管新生及血管翳形成,从而减轻滑膜的炎症反应。
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