抗PEDV高免卵黄抗体的制备及其初步应用

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猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由冠状病毒属的猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起猪的一种高急性、传染性肠道病毒病。此疫病的流行和传播,已严重影响到我国养猪行业的发展。当前疫苗免疫是防治我国猪群PED的主要手段,但效果不佳,且该病在治疗方面尚无特效药物。目前,仔猪流行性腹泻在全国各大小猪场频繁发生。疫情以发病快、传播迅速、范围广、发病率高、死亡率高、造成损失严重等特点,主要侵染1周龄左右的产房仔猪,发病率最高达100%,死亡率90%以上。患病仔猪病症常表现为:精神抑郁,嗜睡,食欲不振,脱水,身形消瘦,被毛粗乱,粪便呈黄色、黄白色以及棕色水样从肛门排出,呕吐时常伴有未消化的凝乳块。剖检后观察到的病理变化主要有:肠系膜、肠系膜淋巴结、腹股沟淋巴结肿大出血,肠内多为腥臭的黄色或者褐色液体。本病的发生,给新生仔猪的存活带来严重威胁,使养猪业损失惨重。为了制备抗PEDV高免卵黄抗体并探究其在仔猪PED防治中的应用效果,开展了如下三方面的研究:1.抗PEDV高免卵黄抗体如何制备的研究。本次研究采用RT-PCR检测结果为阳性的仔猪整段小肠,制成PEDV油乳剂灭活抗原用于蛋鸡的免疫,利用本实验室已建立ELISA方法检测卵黄抗体水平,并以此为标准收集抗体水平最高时间段的鸡蛋。继续采用琼脂扩散法收集抗体效价大于26的高免蛋,利用酸化水法提取卵黄抗体液,经无菌安全试验后实际用于仔猪PED的防治。2.抗PEDV高免卵黄抗体用于仔猪PED治疗效果的研究。本次研究,分别选取江苏盐城、安徽长丰、安徽阜南三家猪场各70、139、160头30日龄内PEDV呈阳性的腹泻仔猪作为治疗对象。分为自然发病,抗生素、补液盐治疗和卵黄抗体治疗三组,其中自然发病116头,抗生素、补液盐治疗94头,卵黄抗体治疗159头。结果显示:自然发病组仔猪存活率仅为9.4%;采用抗生素、补液盐治疗组存活率达到了17%;而采用卵黄抗体治疗组存活率高达79.9%,说明抗PEDV高免卵黄抗体治疗仔猪PED效果显著。且治疗中发现,病程越短,发病日龄越高的仔猪治疗效果越好。卵黄抗体治疗仔猪与自然发病对照仔猪相比,体内排泄的病毒量呈显著减少趋势,粪便由恶臭水样至膏状至固体颗粒状,精神、食欲恢复,不再呕吐腹泻直至痊愈。3.抗PEDV高免卵黄抗体用于仔猪PED预防效果的研究。本次研究,选取正在爆发PED的安徽长丰某猪场12小时内新生未感染PEDV仔猪85头;安徽阜南某猪场12小时内新生未感染PEDV仔猪29头作为预防对象。其中,卵黄抗体预防组62头,对照组52头。结果显示,抗PEDV高免卵黄抗体预防组发病率为9.8%,存活率为96.8%;对照组发病率为59.6%,存活率为46.2%。说明采用抗PEDV高免卵黄抗体对新生仔猪进行预防,能很大程度降低仔猪感染PEDV的概率,从而保证新生仔猪的存活率。但抗PEDV高免卵黄抗体在实际临床防治应用中的效果,可能会受到仔猪自身疾病,病情发展状况,猪场饲养管理及防疫措施等各方面因素的影响。因此我们在应用抗PEDV高免卵黄抗体防治仔猪PED的同时,要做好前期诊断工作,在调查完全后适当使用卵黄抗体液,使其达到最好的防治效果,为防治仔猪PED提供一种高效、方便的途径。
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