【摘 要】
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目的:探索骨化三醇（1α,25-二羟维生素D3,1α,25（OH）2D3,以下简称1,25D）对伴2型糖尿病牙周炎大鼠牙龈组织炎症表达的影响以及自噬在此过程中的作用。方法:选8周龄SD雄性大鼠20只,体重220±20 g,16只糖尿病大鼠,采用高脂饲养联合低剂量链脲佐霉素构建,4只非糖尿病大鼠,全部大鼠丝线结扎联合P.gingivalis建立牙周炎模型。模型建立后分为5组,分别为非糖尿病空白组、糖
【基金项目】
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国家自然科学基金（81670999）； 沈阳市科技局中青年科技创新人才支持计划（RC170520）；
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目的:探索骨化三醇（1α,25-二羟维生素D3,1α,25（OH）2D3,以下简称1,25D）对伴2型糖尿病牙周炎大鼠牙龈组织炎症表达的影响以及自噬在此过程中的作用。方法:选8周龄SD雄性大鼠20只,体重220±20 g,16只糖尿病大鼠,采用高脂饲养联合低剂量链脲佐霉素构建,4只非糖尿病大鼠,全部大鼠丝线结扎联合P.gingivalis建立牙周炎模型。模型建立后分为5组,分别为非糖尿病空白组、糖尿病空白组、糖尿病1,25D组、糖尿病自噬抑制剂3-MA组及糖尿病1,25D+自噬抑制剂3-MA组,每组4只,每日以丙二醇:水:乙醇=60:30:10溶剂,0.2μg/kg 1,25D的溶剂,15 mg/kg自噬抑制剂3-MA溶剂及15 mg/kg自噬抑制剂3-MA+0.2μg/kg1,25D溶剂各0.2 m L分别腹腔注射给对应组大鼠,连续1周。给药结束后处死大鼠并取材。观察如下指标:（1）Micro-CT观察大鼠牙槽骨丧失情况;（2）HE染色观察组织炎症情况;（3）免疫组织化学染色法检测自噬指标LC3和Beclin-1牙龈组织表达情况,炎症指标NFκB-p65和TNF-α在牙龈组织表达情况;（4）Western-Blot法检测LC3II/LC3I及p-p65的表达情况。结果:（1）糖尿病空白组牙槽骨丧失量显著高于非糖尿病空白组（P﹤0.05）。（2）糖尿病空白组牙龈组织内NFκB-p65和TNF-α表达高于非糖尿病空白组（P﹤0.05）。（3）糖尿病空白组牙龈组织内LC3、Beclin-1以及LC3II/LC3I蛋白表达低于非糖尿病空白组（P﹤0.05）。（4）糖尿病1,25D组牙龈组织内NFκB-p65、TNF-α表达水平以及p-p65蛋白水平低于糖尿病空白组,LC3、Beclin-1表达水平以及LC3II/LC3I蛋白水平高于糖尿病空白组（P﹤0.05）。（5）糖尿病自噬抑制剂3-MA组大鼠NFκB-p65、TNF-α表达水平以及p-p65蛋白水平高于糖尿病1,25D组,LC3、Beclin-1染色强度以及LC3II/LC3I蛋白水平低于糖尿病1,25D组（P﹤0.05）。（6）糖尿病1,25D+自噬抑制剂3-MA组牙龈组织内NFκB-p65、TNF-α表达水平以及p-p65蛋白水平低于糖尿病自噬抑制剂3-MA组,LC3、Beclin-1表达水平以及LC3II/LC3I蛋白水平高于糖尿病自噬抑制剂3-MA组（P﹤0.05）。结论:（1）2型糖尿病牙周炎模型中,糖尿病大鼠牙龈组织炎症加重;（2）2型糖尿病大鼠自噬水平不足;（3）抑制自噬可加重糖尿病大鼠牙龈组织的炎症反应;（4）1,25D可通过促进自噬抑制2型糖尿病大鼠牙龈组织炎症反应。
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