研究目的：　　嗜酸细胞性胃肠炎(Eosinophilic gastroenteritis,EG)是以胃肠道的某些部位弥漫性或局限性嗜酸性粒细胞(eosinophil,Eos)异常浸润为特征的胃肠道疾，近年EG的发病率逐渐升高，其发病机制仍未完全明确。本实验通过建立卵清蛋白（ovalbumin,OVA）诱导的嗜酸性粒细胞胃肠炎（Eosinophilic Gastroenteritis,EG）小鼠模型，检测EG小鼠血清中OVA特异性IgE(OVA-sIgE)、嗜酸性粒细胞趋化因子（eotaxin,EOT）水平；同时，检测 EG小鼠胃、肠道组织的白介素5(interleukin5,IL-5)、γ-干扰素(Interferon-gamma,IFN-γ)、Toll样受体4（toll-like receptor-4,TLR4）的表达水平，以研究EG可能的发病机制，从而探讨TLR4在EG中的作用。在EG治疗手段的探讨方面，本实验应用糖皮质激素（强的松）、孟鲁司特（顺尔宁）、蒙脱石（思密达）干预并观察疗效，为EG临床用药提供新的思路和途径。　　研究方法：　　本实验分两部分，第一部分：建立 EG小鼠模型；第二部分：应用三种药物干预并观察疗效。　　第一部分实验：24只雌性，6周龄的Balb/c小鼠，适应性喂养1周后，随机分为正常对照组(n=8)、OVA处理组(n=8)、安慰剂组（n=8）。对OVA处理组小鼠处理：第1天，予OVA/Al(OH)3/生理盐水（500ug/lmg/0.5ml）基础致敏1次；分别于第8天和第15天，予OVA/生理盐水（500ug/0.5ml）强化致敏1次，第18-30天，予PLGA包裹的OVA/生理盐水（lmg/8mg/0.3ml）隔日灌胃激发（共7次）；同时，予安慰剂组等量的佐剂行腹腔注射和生理盐水灌胃。正常对照组不作特殊处理，正常喂养。3组小鼠于第31天处死，取外周血行 EOS计数；用ELISA法检测血清OVA特异性IgE水平，取食管下段、胃窦、空肠、回肠和结肠组织，HE染色观察其病理学变化，以验证造模是否成功。　　第二部分实验：56只雌性，6周龄的Balb/c小鼠，适应性喂养1周后，随机分为正常对照组、模型1组、模型2组、强的松治疗组、顺尔宁治疗组、思密达治疗组、思密达预防组，每组8只。正常对照组不作特殊处理，正常喂养，模型1组处理同实验一的OVA处理组，模型2组经致敏和激发后不作干预，正常喂养；强的松治疗组经致敏和激发后予强的松（3mg/kg）灌胃连续2周；顺尔宁治疗组经致敏和激发后予顺尔宁(1.5mg/kg)灌胃连续2周、思密达治疗组经致敏和激发后予思密达（6g/kg）灌胃连续1周，思密达预防组经致敏后予思密达（6g/kg）灌胃连续1周，再予OVA灌胃激发。各组小鼠均于处理24小时后处死，取外周血行Eos计数；用ELISA法检测IgE、Eotaxin的含量；取食管下段、胃窦、空肠、回肠和结肠组织，HE染色观察其病理学变化；免疫组织化学方法检测胃肠组织TLR4、IL-5、IFN-γ的表达水平。　　统计学方法：采用SPSS19.0进行数据的统计分析，检测结果以（均数±标准差）表示，对三组及以上的定量资料采用单因素方差分析及两两比较的LSD-t检验，免疫组化评分用非参数统计分析，以P＜0.05表示差异有统计学意义。　　结果：　　1、各组小鼠的临床表现：　　1.1、OVA处理组小鼠在致敏后均出现不同程度的活动减少、精神不佳、竖毛、弓背等表现，激发胃肠道过敏后其中6只小鼠排糊状或水样便、肛周沾粪，体重进行性下降。正常对照组与安慰剂组小鼠毛发光泽,精神良好,活动正常。　　1.2、模型1组小鼠表现与实验一OVA处理组相似。模型2组小鼠在停止激发1周后排成形大便，仍有精神不佳等表现，体重仍有下降趋势。强的松治疗组小鼠给药2-4天后症状改善，表现较前活跃，1周后出现体重增长。顺尔宁治疗组小鼠给药1周后仍有懒动、精神不佳等表现，体重仍有下降。思密达治疗组小鼠给药2、3天后排成形大便，余症状无明显变化。思密达预防组小鼠致敏后均出现懒动、精神不佳等表现，激发后有5只排糊状或水样便，伴体重进行性下降。　　2、小鼠外周血Eos计数：　　2.1、正常对照组、安慰剂组和OVA处理组的Eos计数有统计学差异（F=7.859，P=0.030）。其中，正常对照组、安慰剂组 Eos计数无统计学差异（P=0.990），OVA处理组Eos较正常对照组升高，有统计学差异（P=0.032）。　　2.2、正常组、模型1组和模型2组小鼠的外周血 Eos计数有统计学差异（F=3.841，P=0.038）。其中，模型1组与模型2组Eos计数无明显差异（P=0.671），模型1组Eos计数较正常组高，有统计学差异（P=0.029），模型2组Eos计数较正常组高，有统计学差异（P=0.025）。药物干预后,强的松治疗组、顺尔宁治疗组、思密达治疗组、思密达预防组小鼠的外周血Eos计数与模型1组、模型2组比较无统计学差异（F=0.237， P=0.944），各药物组之间无统计学差异（F=0.320，P=0.811）。　　3、小鼠血清OVA-sIgE的水平：　　3.1、正常对照组、安慰剂组和OVA处理组小鼠血清OVA-sIgE水平有统计学差异（F=1.218，P=0.000），其中，正常对照组、安慰剂组小鼠血清OVA-sIgE水平无统计学差异（P=0.556），OVA处理组小鼠血清OVA-sIgE水平较正常对照组高，有统计学差异（P=0.000）。　　3.2、正常对照组、模型1组和模型2组小鼠血清OVA-sIgE水平有统计学差异，（F=628.852,P=0.000），其中，模型1组与模型2组小鼠血清 OVA-sIgE水平无统计学差异（P=0.053），模型1组小鼠血清OVA-sIgE水平较正常组高，有统计学差异（P=0.000），模型2组OVA-sIgE水平较正常组高，有统计学差异（P=0.000）。药物干预后，模型1、2组和强的松治疗组小鼠血清OVA-sIgE水平有统计学差异（F=60.464，P=0.000），其中，强的松治疗组小鼠血清OVA-sIgE水平比模型1、2组低，有统计学差异（P=0.000）。顺尔宁治疗组、思密达治疗组、思密达预防组小鼠血清OVA-sIgE水平与模型1、2组无统计学差异（F=1.045， P=0.398）。各药物处理组之间有统计学差异（F=47.610，P=0.000）。其中，强的松治疗组小鼠血清OVA-sIgE水平比顺尔宁治疗组*、思密达治疗组**、思密达预防组***低，有统计学差异（P*=0.000，P**=0.030，P***=0.037），顺尔宁治疗组、思密达治疗组、思密达预防组OVA-sIgE水平无统计学差异（F=1.126， P=0.343）。　　4、小鼠血清Eotaxin的水平：　　正常组、模型1组和模型2组小鼠血清 Eotaxin水平有统计学差异（F=1.705,P=0.000），其中，模型1组小鼠血清Eotaxin水平比正常组高，有统计学差异（P=0.000），模型2组小鼠血清Eotaxin水平比正常组高，有统计学差异（P=0.000），模型2组小鼠血清Eotaxin水平较模型1组低，有统计学差异（P=0.000）。各药物干预组小鼠血清 Eotaxin水平与模型1组比较有统计学差异（F=230.09，P=0.000），强的松治疗组*、顺尔宁治疗组**、思密达治疗组***、思密达预防组****小鼠血清 Eotaxin水平比模型1组低，有统计学差异（P*=0.000，P**=0.013，P***=0.046，P****=0.037），各药物干预组小鼠血清Eotaxin水平与模型2组比较无统计学差异（F=3.778，P=0.064）。各药物组之间无统计学差异（F=0.310，P=0.921）。　　5、小鼠消化道组织病理：　　实验一：OVA处理组小鼠的胃、空肠组织粘膜变薄、断裂，下层充血，腺上皮脱落，均有嗜酸性粒细胞增多，不同程度的炎症细胞浸润，而食管下段、回肠、结肠未见明显异常。正常组和安慰剂组小鼠各段组织基本结构正常，未见嗜酸性粒细胞增多。　　实验二：模型1组、2组小鼠胃、空肠组织病理改变与实验一的OVA处理组相似。强的松治疗组小鼠胃、空肠粘膜各层结构基本正常,仅见轻微充血及炎症细胞浸润，EOS浸润程度较轻。顺尔宁治疗组、思密达治疗组、思密达预防组的病理改变未见改善，与模型1、2组相似。　　6、小鼠胃、空肠组织的IL-5、IFN-γ、TLR4表达水平：　　6.1、正常对照组小鼠胃、空肠TLR4、IL-5、IFN-γ均有表达。　　七组小鼠胃与空肠的IL-5水平无统计学差异（H=4272.515，P=0.637）；七组小鼠胃与空肠的IFN-γ水平无统计学差异（H=2473.483，P=0.433）；七组小鼠胃与空肠的TLR4水平无统计学差异（H=374.328，P=0.827）。　　6.2、IL-5：正常组、模型1组、模型2组和强的松治疗组小鼠胃空肠IL-5水平有统计学差异（F=59.296，P=0.000），其中，模型1组*、模型2组**、强的松治疗组***小鼠胃空肠 IL-5水平比正常组高，有统计学意义（P*=0.000， P**=0.000，P***=0.000）；强的松治疗组小鼠胃空肠IL-5水平比模型1组*、模型2组**低，有统计学意义（P*=0.000，P**=0.000）；模型1组和模型2组小鼠胃空肠IL-5水平无统计学差异（P=0.401）。正常组、模型1组、模型2组和顺尔宁治疗组小鼠胃空肠IL-5水平有统计学差异（F=54.658，P=0.000），其中，模型1组*、模型2组**、顺尔宁治疗组***小鼠胃空肠IL-5水平比正常组高，有统计学意义（P*=0.000，P**=0.000，P***=0.000）；顺尔宁治疗组小鼠胃空肠IL-5水平与模型1组*、模型2组**无统计学差异（P*=0.267，P**=0.426）。正常组、模型1组、模型2组和思密达治疗组小鼠胃空肠IL-5水平有统计学差异（F=45.293，P=0.000），其中，模型1组*、模型2组**、思密达治疗组***小鼠胃、空肠的IL-5水平比正常组高，有统计学意义（P*=0.000，P**=0.000， P***=0.000）；思密达治疗组小鼠胃空肠IL-5水平与模型1组*、模型2组**无统计学差异（P*=0.280，P**=0.828）。正常组、模型1组、模型2组和思密达预防组小鼠胃空肠IL-5水平有统计学差异（F=47.893，P=0.000），其中，模型1组*、模型2组**、思密达预防组***小鼠胃、空肠的IL-5水平比正常组高，有统计学差异（P*=0.000，P**=0.000，P***=0.000），思密达预防组小鼠胃、空肠的IL-5水平与模型1组*、模型2组**无统计学差异（P*=0.377，P**=0.658）。　　6.3、IFN-γ：正常组、模型1组、模型2组和强的松治疗组小鼠胃空肠IFN-γ水平无统计学差异（F=1.220，P=0.310）。正常组、模型1组、模型2组和顺尔宁治疗组小鼠胃、空肠IFN-γ的水平无统计学差异（F=0.733，P=0.536）。正常组、模型1组、模型2组和思密达治疗组小鼠胃、空肠IFN-γ的水平无统计学差异（F=0.529，P=0.664）。正常组、模型1组、模型2组和思密达预防组小鼠胃、空肠IFN-γ的水平无统计学差异（F=0.632，P=0.597）。　　6.4、TLR4：正常组、模型1组、模型2组和强的松治疗组小鼠胃、空肠TLR4的水平无统计学差异（F=0.974，P=0.429）。正常组、模型1组、模型2组和顺尔宁治疗组小鼠胃、空肠TLR4的水平无统计学差异（F=0.677，P=0.610）。正常组、模型1组、模型2组和思密达治疗组小鼠胃、空肠TLR4的水平无统计学差异（F=0.742，P=0.567）。正常组、模型1组、模型2组和思密达预防组小鼠胃、空肠TLR4的水平无统计学差异（F=0.674，P=0.613）。　　结论：　　1、OVA作为过敏原，成功诱导小鼠出现过敏表现和在胃、空肠组织出现嗜酸性粒细胞浸润等相应的病理变化。　　2、EG模型小鼠血清OVA-sIgE呈持续性高水平表达；血清Eotaxin水平在疾病早期时相升高，而在持续阶段有下降趋势；EG模型小鼠胃、空肠组织的IL-5水平升高，IFN-γ、TLR4表达无明显变化。　　3、强的松治疗可改善EG小鼠过敏表现和胃、空肠组织的炎症病理改变；顺尔宁、思密达处理后，EG小鼠的过敏表现和胃、空肠组织炎症病理改变未见明显改善。　　4、强的松治疗后， EG小鼠血清OVA-sIgE水平降低和胃、空肠组织IL-5的表达下调，对血清 Eotaxin水平和胃、空肠组织 IFN-γ、TLR4的表达无明显影响；顺尔宁、思密达处理后，EG小鼠血清OVA-sIgE、Eotaxin水平和胃、空肠组织的IL-5、IFN-γ、TLR4表达水平无明显改变。　　5、在EG早期时相应用糖皮质激素有一定疗效，思密达可改善EG伴随的大便性状改变的症状，顺尔宁对EG有无治疗效果仍需进一步探讨。