盐酸小檗碱、丹皮酚的体外联合抗菌作用的实验研究

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由于广谱抗生素、皮质类固醇激素、免疫抑制剂的广泛应用,细菌、真菌感染疾病呈明显上升趋势,临床上应用的抗细菌、抗真菌药物对某些细菌病、真菌病的疗效下降,不良反应增多,甚至对某些真菌感染尚无理想药物。临床上迫切需要高效、低毒的抗菌、抗真菌药物。中草药是近年来较为受关注的新的抗菌药物研究方向。本文以两种中草药的有效单体成分Ber、Pae作为抗菌药,探索了试验条件对Ber体外作用金黄色葡萄球菌的MIC值的影响,Ber与Pae体外各自单用抗菌和联用抗菌的药物敏感试验,同时观察了Ber与Pae协同抗耐药白色念珠菌时对其超微结构的影响,探讨Ber与Pae协同作用机制。具体研究内容如下: Ber对金黄色葡萄球菌有较强的抑制作用,但其MIC值受多种实验因素影响。常量稀释法和微量稀释法测定Ber对金黄色葡萄球菌的MIC值,前者MIC较后者低一个稀释度;用MH培养基测定MIC值时,试验结果较为稳定,三次试验结果均为20μg/ml;Ber对金黄色葡萄球菌的MIC值大体上随pH升高而下降,由pH为4时的160μg/ml降低至pH为8时的5μg/ml。接种细菌浓度对MIC的影响较大,菌液终浓度为2×102CFU/ml时MIC为5μg/ml,菌液终浓度为2×107CFU/ml时MIC为640μg/ml。从生长抑制曲线来看,Ber对金黄色葡萄球菌的抑制作用主要是抑制了其菌体的生长,在16h时出现了一个最低抑菌点。 Ber与Pae在体外单用时对38株供试细菌的MIC值范围分别为5μg/ml到80μg/ml、80μg/ml到320μg/ml;Ber与Pae在体外单用时对11株供试真菌的MIC值范围分别为40μg/ml到320μg/ml、160μg/ml到640μg/ml。 Ber与Pae联用时对大多数供试菌株有显著协同和相加效应,同时均未观察到拮抗效应。Ber与Pae联用对33株供试细菌有显著协同和相加效应,占86.8%;Ber与Pae联用对25株耐药金黄色葡萄球菌有显著协同和相加效应,占83.3%;Ber与Pae联用对10株供试真菌有显著协同和相加效应,占90.9%;Ber与Pae联用对9株耐药白色念珠菌有显著协同和相加效应,占90%。Ber与Pae在中草药有效抗菌成分中有中等程度的抗菌活性,它们的抗菌活性在联合后均被增强。 电镜下观察Ber与Pae协同作用白色念珠菌超微结构的改变,发现MIC的Ber与Pae处理组,大部分白色念珠菌细胞壁溶解破坏,细胞膜连续性破坏,胞质内坏死溶解致细胞器肿胀溶解。这表明Ber和Pae可能通过破坏白色念珠菌细胞壁及胞膜结构而抗真菌。 Ber和Pae在我国资源丰富,成本低廉,有效成分含量高,具有良好的开发 与应用价值。
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