论文部分内容阅读
松墨天牛(Monochamus alteFNatus Hope)是松材线虫在亚洲地区的主要传播媒介,云南瑞丽(含畹町开发区)是我国松材线虫疫区之一。本研究利用分子生物学技术,结合形态特征分析,对云南松墨天牛的种群分化进行了深入探讨,研究结果可为云南松墨天牛种群区分提供依据,为探索畹町松材线虫来源地提供松墨天牛分子生物学与形态学佐证,为制定防止松材线虫扩散相关措施提供思路。
研究对云南6个松墨天牛种群形态特征进行了全面梳理。对比分析了各松墨天牛个体体长、前胸背板纵长、前胸背板横宽、前胸背板斑纹等重要形态特征;通过单因素方差分析考察了这些形态特征与纬度、寄主树木、年均温条件的关系,通过聚类分析和判别分析研究了这6个地理种群的相互关联。结果表明,纬度、寄主树木、气候带对松墨天牛的形态产生了影响;聚类分析中畹町种群与云南其他种群的形态差异最大;判别分析建立的判别函数能有效的将畹町种群与云南其他种群区分开来。
研究对云南6个种群及浙江、湖北松墨天牛mtDNA COII基因序列部分片段进行了测序及序列分析,包括碱基组成、种群核苷酸多态性(Pi)、种群间核苷酸差异(Kxy)计算,单倍型、多态位点统计,Kimura 2-parameter(K2P)遗传距离、Neispairwise(NP)遗传距离的计算,单倍型网络图及系统进化树的构建,AMOVA分析及遗传距离与地理距离、年均温差的Mantel test,GenBank上同一引物扩增的日本松墨天牛及墨天牛属.Monochamus masaoi的COII基因序列的片段的比较。通过mtDNA DNA COII基因的测序,得到的588bp序列片段有18个多样性位点,定义了10个单倍型。实验表明,云南普洱、梁河、华宁、石林、永胜种群亲缘关系较近,而与浙江、湖北种群间亲缘关系较远,种群没有形成明显的族群,彼此间的遗传差异只占总遗传差异的8.32%,地理距离与遗传分化之间只存在极弱的相关性。
畹町种群与云南其他5个地理种群及湖北种群遗传距离相对较远,而与浙江种群遗传距离相对较近。畹町种群与云南其他种群之间的遗传差异占总遗传差异