【摘 要】
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目的:通过观察高原低氧环境下大鼠胃黏膜组织细胞形态、凋亡情况以及检测凋亡相关蛋白P53、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9的m RNA及蛋白的表达水平,揭示细胞凋亡在不同高原低氧时间点变化水平及其在高原低氧所致胃黏膜损伤中的作用。方法:选择50只雄性Wistar大鼠(体重170±10g,平均年龄6-8周龄),按照随机分配原则分为平原对照组(n=10只,西安,海拔500m)与高原低氧
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目的:通过观察高原低氧环境下大鼠胃黏膜组织细胞形态、凋亡情况以及检测凋亡相关蛋白P53、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9的m RNA及蛋白的表达水平,揭示细胞凋亡在不同高原低氧时间点变化水平及其在高原低氧所致胃黏膜损伤中的作用。方法:选择50只雄性Wistar大鼠(体重170±10g,平均年龄6-8周龄),按照随机分配原则分为平原对照组(n=10只,西安,海拔500m)与高原低氧组(n=40只,青海省玉树市杂多县,海拔4300m),根据高原低氧暴露时间不同又随机分为1d、7d、14d、21d,4个亚组,每组各10只;采集各组大鼠胃黏膜组织,分别用HE染色及透射电镜观察胃黏膜组织细胞形态变化及凋亡改变情况;采用Real-time PCR法检测各组大鼠胃黏膜组织中P53、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9m RNA表达水平;采用Western blot法检测各组大鼠胃黏膜组织中P53、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达水平。结果:(1)HE染色显微镜观察结果:平原对照组胃黏膜正常,胃腺结构完整,细胞排列基本规则,而高原实验组大鼠胃黏膜组织随高原低氧暴露时间延长,炎症细胞浸润逐渐增多,胃腺周围局部出血,胃腺结构破裂,局部细胞肥大,边界不清,并且胃黏膜细胞出现细胞核固缩凋亡;(2)透射电镜观察结果:对照组胃黏膜细胞正常,随着时间延长,无特殊表现;而实验组随着高原低氧环境暴露时间延长,细胞排列紊乱,细胞核形状不规则,细胞质内线粒体肿胀明显,细胞质内可见自噬样结构及被吞噬的凋亡细胞;(3)Real-time PCR法检测结果:与对照组比较,实验组各亚组大鼠胃黏膜组织P53、Caspase-3、Caspase-9 m RNA表达水平均升高,差异具有统计学意义(p<0.05),且随暴露时间的延长表达水平逐渐增加(p<0.05),而Bcl-2 m RNA表达水平在低氧1d组升高(p<0.05),随后随着高原低氧环境暴露时间延长,其表达水平逐渐降低(p<0.05)(4)Western blot法结果:与对照组相比,实验组大鼠胃黏膜组织P53、Caspase-3、Caspase-9蛋白表达水平均升高(p<0.05),且随暴露时间的延长表达水平逐渐增加,Bcl-2蛋白表达水平降低,且随着暴露时间的延长表达水平逐渐降低(p<0.05)。结论:高原低氧可能通过升高细胞凋亡水平导致胃黏膜组织细胞损伤,并且细胞凋亡水平的升高与高原低氧暴露时间成正相关。
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