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目的对碱蓬草根际的细菌进行分离鉴定,进行初步的遗传学分析;对碱蓬草根际产淀粉酶的细菌进行筛选;对淀粉酶活性最高的菌株进行发酵条件的优化和酶学性质的探索。方法采集辽宁省锦州市凌海区凌海大桥下碱蓬草生长区域的土壤,采用不同p H和Na Cl浓度(w/v)筛选适合的实验条件;对比碱蓬草根际与邻近泥沟处细菌的数量差异;采用稀释涂布平板法对细菌进行筛选与分离纯化,对分离得到的细菌进行形态观察和显微镜检察,排除相同的菌株。对得到的菌株进行基因组DNA的提取,将提取到的DNA进行PCR扩增并对细菌的基因序列进行检测,将测序的结果在NCBI上进行BLAST比对,确定相似度最高的种属;采用MEGA-6进行系统发育分析,对碱蓬草根际细菌进行遗传学的初步分析。采用含1%可溶性淀粉的培养基进行产淀粉酶菌株的筛选,初筛采用透明圈法,复筛时采用DNS法检测淀粉酶活力。选择淀粉酶活力最高的菌株进行发酵条件的优化,探索了最佳的发酵条件;对获得的淀粉酶进行了酶学性质的初步研究;并对淀粉酶活力最高的细菌进行生长与淀粉酶活性情况测定,绘制生长曲线和酶活曲线。结果实验条件为pH 9.0、Na Cl浓度(w/v)为10%时的细菌数量最多,为最适实验条件;发现碱蓬草根际的细菌数量多于邻近的泥沟处。通过对细菌的分离纯化和排重,共得到61株细菌,通过16Sr DNA测序与BLAST比对发现这61株细菌分属于17个属,其中Halomonas denitrificans属为优势属,数量占24.59%。淀粉酶初筛得到两株产生明显透明圈的细菌5号和41号,复筛测得细菌5号的酶活力为78.51 U/m L,细菌41号的酶活力为76.61 U/m L。对细菌5号进行了发酵条件的优化,淀粉酶活力提高为初始酶活力的6.09倍。通过对细菌5号产生的淀粉酶性质的研究发现,这种淀粉酶的最适温度为70℃,在20℃与90℃之间仍保持60%以上的酶活力;在90℃时保温一小时后仍可保持初始酶活力的70%以上,说明这种酶具有较好的温度稳定性。最适p H为p H 9.0,在p H 8.0和p H 10.0之间保温一小时后仍可保持50%以上的活力,说明这种淀粉酶在碱性条件下可以保持较高的酶活力。分别在培养基添加了Cu2+,Mg2+,Zn2+,Co2+,Fe2+,Mn2+,Ni2+,Ca2+,K+和Ba2+十种金属离子并测定酶活力发现,Fe2+对淀粉酶的激活作用最明显,添加Mn2+时的稳定性最好。通过对细菌5号的生长曲线和酶活曲线进行分析发现,细菌5号在前10 h内处于迟缓期,10 h与22 h之间处于对数生长期,22 h和34 h间处于相对稳定期,34 h后属于衰亡期;在发酵后24 h时的酶活力最高。结论本实验从碱蓬草根际分离得到61株细菌,这61株细菌分属于17个种属,构建这61株细菌的系统发育树发现碱蓬草根际细菌的多样性比较好。对这61株细菌的产淀粉酶能力进行筛选,确定细菌5号的淀粉酶活力最高;通过响应面优化将细菌5号的酶活力提高为初始酶活力的6.09倍;通过对这种淀粉酶的酶学性质研究发现,这种淀粉酶在高温和高p H下都具有较好的稳定性,具有良好的工业酶发展前景。