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【目的】为了解广东省妇幼保健院新生儿科病房产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的流行情况、基因型特点及其耐药性，对50株来自新生儿科病房的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs进行检测，对产酶株进行TEM、SHV和CTX-M基因分型，并检测其对9种抗生素的最低抑菌浓度(MIC)。
【方法】
1．收集广东省妇幼保健院2005年1月至12月大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离菌株50株，其中大肠埃希菌12株，肺炎克雷伯菌38株；
2．采用美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)推荐的ESBLs表型确证试验(纸片扩散法)筛选产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌共22株，其中大肠埃希菌5株，肺炎克雷伯菌17株；
3．应用传统碱裂解法提取产ESBLs菌的质粒DNA；
4．以菌株的质粒DNA为模板，应用PCR法分别扩增22株产ESBLs菌株的TEM、SHV和CTX-M基因；
5．应用ABI 377自动荧光DNA测序仪对所有阳性的PCR产物进行双向DNA测序；并进行序列拼接、检索及基因分型；
6．应用琼脂稀释法检测9种抗生素对所有22株产ESBLs菌株的最低抑菌浓度(MIC)，检测的抗生素包括亚胺培南、头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦、头孢噻肟、环丙沙星、头孢西丁、阿米卡星、头孢他啶、氨曲南。
【结果】
1．ESBLs的检出率：50株细菌中，检出ESBLs阳性菌22株，检出率为44％，其中大肠埃希菌5株，肺炎克雷伯菌17株；
2．产ESBLs菌株的标本分布：22株ESBLs阳性株分别来自呼吸道分泌物(12株)、血液(6株)和脐分泌物(4株)；
3．大肠埃希菌基因分型结果：5株大肠埃希菌中，3株同时检出CTX-M-14和TEM-1，1株检出CTX-M-14，1株三种基因均未检出；
4．肺炎克雷伯菌基因分型结果：17株肺炎克雷伯菌中7株同时检出CTX-M-14型和SHV-12，9株只检出SHV-12，1株只检出CTX-M-14：@5．MIC检测结果：亚胺培南的抗菌活性最高，敏感率为100％，MIC<,50>和MIC<,90>分别为0.25μg/ml和0.5μg/ml；其次为头孢吡肟，敏感率为95.5％，MIC<,50>和MIC<,90>分别为2μg/ml和4μg/ml；环丙沙星的抗菌活性也较高，敏感率为90.9％，MIC<,50>和MIC<,90>分别为0．125μg/ml和1 μg/ml；哌拉西林/他唑巴坦的敏感率为86.4％，MIC<,50>和MIC<,90>分别为4μg/ml和32 μg/ml：头孢西丁和阿米卡星的敏感率分别为68.2％和63.6％；头孢噻肟、头孢他啶和氨曲南的敏感率则不足40％，分别为36.4％、27.3％和27.3％。
【结论】
1．广东省妇幼保健院新生儿科病房大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLs的检出率较高，为44％；
2．SHV-12型ESBls是广东省妇幼保健院新生儿科病房最常见的ESBLs，其次为CTX-M-14：
3．产ESBLs菌对亚胺培南100％敏感，对其它抗生素均有不同程度耐药。