研究背景 肾素-血管紧张素系统(RAS)与血管内皮损伤过程密切相关，其主要效应分子血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)有显著的促血管内皮炎性损伤作用。感染是急性肺损伤(ALI)最常见的病因，已知革兰阴性(G~-)菌内毒素(LPS)在严重感染时可致肺微血管内皮通透性增高，进而形成肺水肿；同时LPS还激活循环和肺组织的RAS，导致Ang Ⅱ水平升高，据此我们推测Ang Ⅱ可能参与LPS致ALI的发生、发展过程。在各种原因所致ALI中，肺微血管内皮细胞(PMVEC)的损伤首先出现，为进一步阐明Ang Ⅱ对PMVEC的作用机制，我们探讨Ang Ⅱ受体在大鼠肺微血管内皮细胞(RPMVEC)的分布及调控特征，并进一步研究Ang Ⅱ及其受体在大鼠内毒素性ALI病理过程中的作用。 研究内容 本研究分两个阶段。实验第一阶段在体外成功分离、培养RPMVEC的基础上进行，内容包括：(1) 采用RT-PCR、Western blot和放射性配基结合分析法，分别检测Ang Ⅱ受体的mRNA、蛋白表达水平以及受体的结合活性；(2) 观察以LPS／Ang Ⅱ干预RPMVEC之后，Ang Ⅱ受体mRNA和蛋白表达水平的变化。 实验第二阶段分别在大鼠的内毒素性ALI模型以及RPMVEC中进行，内容包括：(1) 测定内毒素性ALI大鼠肺组织中Ang Ⅱ水平；(2) 在LPS致大鼠ALI模型上以①肺组织湿／干重比；②组织病理学检查；③伊文思蓝(EB)荧光定量的方法，分别观测LPS和／或Ang Ⅱ对大鼠肺组织微血管内皮通透屏障的影响，以及Ang Ⅱ受体拮抗剂的干预作用；(3) 在RPMVEC单层水平上分别观察LPS和／或Ang Ⅱ对单层通透性的影响，以及Ang Ⅱ受体拮抗剂的干预作用；(4) 应用流式细胞仪和