检测GPV抗体的间接ELISA方法的建立及初步应用

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 10次 | 上传用户:harrietgu
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
小鹅瘟(Gosling Plague,GPa)是由细小病毒科、细小病毒属中的鹅细小病毒(Goose Parvovirus,GPV)引起的一种烈性传染病。该病毒主要使1月龄内雏鹅和雏番鸭发生的一种急性、高度接触性、败血性传染病,传染性强且死亡率高。危害与日龄密切相关,10日龄内雏鹅发病率和死亡率可达100%,在易感群中的致死率高达70%,以后发病随日龄增大而逐渐减少。但近几年有报道称该病的发病日龄有增大趋势,超过30日龄的占14.3%,这可能与鹅细小病毒毒力增强和基因变异有关。自1956年我国学者方定一首次发现并分离到病毒至今,国内外一直有分离到该病毒的报告,说明该病已经呈世界范围流行,对养鹅业的威胁极大。本试验旨在研究鹅细小病毒抗体的ELISA检测方法的建立,并初步应用于田间试验。小鹅瘟病毒一般不引起大鹅发病,可使大鹅呈现隐性感染,持续带毒、排毒,从而造成病毒的水平传播。小鹅瘟血清抗体的检测不但能监测鹅健康状态,而且也能检测疫苗免疫的抗体水平,特别是对隐性感染带毒的大鹅的检测,对减少大鹅体内毒株水平或垂直传播具有一定意义。到目前为止对小鹅瘟抗体的检测国内外报道的有琼脂扩散试验和中和试验,但是很多学者报道琼脂扩散试验灵敏度不高,并且需要高效价的抗血清及浓缩的尿囊液,而中和试验有操作繁琐、费时较长、费用大、实际应用中不易推广的缺点,为弥补上述两种检测小鹅瘟血清抗体的试验方法的不足,而建立间接ELISA方法来检测GPV的抗体,为疫苗免疫的抗体水平监测和流行病学调查提供一定的基础。本试验用鸭胚增殖鹅细小病毒,氯仿处理、差速离心、PEG沉淀、Sephrose-4B柱层析综合处理,提纯病毒抗原。用该抗原与购买的小鹅瘟弱毒活疫苗免疫健康成年鹅制备高免血清,作为ELISA试验的参考阳性血清,检测ELISA OD值大于1.0。参考阴性血清是从偏远的非疫区的农村采自不同日龄不同种的非免疫的50只20日龄左右的小鹅的血清,检测ELISA OD值小于0.3。检测ELISA OD值小于0.3。从鹅血清中提取IgG免疫家兔,制备兔抗鹅酶标抗体,测得效价为1:6400。摸索ELISA的反应条件并建立ELISA方法,确定小鹅瘟抗体临界值为OD190≧0.35,并初步应用于田间检测,测得100日龄以上的436只大鹅小鹅瘟抗体ELISA的阳性率为87.49%,而30日龄以内的239只小鹅阳性检出率为94.08%。通过本试验的研究,建立了间接ELISA方法,添补了国内的空白。该方法敏感,快速,操作简便,适合基层应用,也适合实验室诊断。
其他文献
摘要: 良好的师生关系,能促使学生们思维活跃,注意力集中,收到意想不到的课堂教学效果。所以,关爱学生、尊重学生,建立起良好的师生关系,是我们提高化学课堂教学质量的重要方法之一。  关键词: 化学课堂 师生关系 教学质量    化学是一门充满神奇色彩、实用性很强的科学,也是一门以实验为主导来体验化学和探究化学的科学,充分体现了它的实践性。实验是学生学习化学的窗口,奇妙的化学变化、多彩的实验现象、广泛
摘要: 听课、评课是各校教研活动的常规方式,也是取人之长,补己之短的有效过程。教师只有运用各种手段更好地听课评课,才能提高自己的教学水平。   关键词: 听课 教学水平 评课    听课是教学研究的有效手段。在倡导大力开展校本研究的今天,开展听课活动,研究并改进教学中存在的问题显得尤为重要。“他山之石,可以攻玉”,只有经常听其他教师的课,研究别人的教学长处,找出彼此的差距,教师才可以有效提升自己的
个人长尾客户作为商业银行规模庞大的客户群体,一直以来没有得到重视,而数字金融的发展将长尾客户的经营变成可能.本文从商业银行对个人长尾客户的管理角度,分析长尾客户管理
伴随着我国现代素质教育体系的不断完善,小学语文的教学手段也是层出不穷的,通过读写结合的教学法,不仅有效地提升了学生的阅读理解能力,还能够进一步的促进学生写作能力,具
随着高校内涵建设发展,教科研成果及相关信息数据逐年激增,国内外高校对教科研过程化管理,已普及使用信息化大数据管理系统,在这种背景下,高教学界开始高度关注教科研的信息
摘要: 网络小说在发展的同时,已逐步成为不少初中生的主要阅读资源,在满足学生阅读需求和猎奇心理的同时,对初中学生的成长产生了较大的负面影响。部分网络小说宣扬了封建迷信思想,宣扬了暴力,宣扬了色情,使部分学生患上“网络书瘾”,脏化了语言,痞化了行为,使学生成绩下降,沉迷幻想。  关键词: 网络小说 初中生 影响    近年来,网络小说日愈红火,在造就一批网络写手的同时,也为人们提供了一种新的娱乐放松
课改以来,全国上下掀起了一轮课程改革热潮.但在实践过程中,由于受到教师传统教学观念、教育教学资源等因素影响,使得课堂教学存在“穿新鞋、走老路”现象,这样不仅不能激发
对于信息技术课程来说,最核心的素养就是计算思维,其对于学生的信息技术掌握能力具有积极影响,同时也是学生的必备能力.为了深入研究,本文将以高中信息技术教育为例,分析计算
著名教育家陶行知先生曾经说过:“发明千千万,起点是一问。”纵观科学发展史,几乎每一次质的飞跃都从问题开始,可见问题是科学创新的起源。这就要求教师在教学中必须把学生要学习的内容巧妙地转化为问题情境。问题情境就是一种具有一定的困难,需要学生努力去克服(寻找完成任务的途径、方式),而又在学生能力范围内(经过努力可克服)的学习情境。根据认知理论,数学课堂教学过程应是以不断地提出问题并解决问题的方式来获取新
高校为国家发展培养更多人才,法律意识强弱对未来社会影响较大,如果能在高校推动法制宣传教育,高校学生的素质会更高.法制校园建设在法制宣传教育的推动下更有意义,有形无形