孤独症（Autism Spectrum Disorder,ASD）是一种神经发育紊乱性疾病,主要表现为社会交流交互障碍、兴趣狭隘以及重复刻板行为。目前孤独症的发病原因和致病机制尚不明确。多个脑区病变与孤独症相关,越来越多证据表明小脑也参与其中。大量孤独症患者存在小脑缺陷,包括小脑体积减小以及浦肯野细胞数量减少和形态异常等。动物模型研究也表明,小脑尤其是浦肯野细胞异常导致孤独症样症状。CHD8是近年来发现的孤独症高风险基因之一,有研究报道在小鼠的颗粒细胞中敲除Chd8导致其发育缺陷和功能异常,但在出生后浦肯野细胞中敲除Chd8并未发现显著影响。本课题以斑马鱼为模型研究chd8在小脑发育中的作用。我们发现chd8突变导致小脑颗粒细胞前体的基因表达异常,分化成熟颗粒细胞的数量下降,将来发育成小脑亚区的细胞集簇也有不同程度的减小。这些结果表明chd8在斑马鱼颗粒细胞发育中的作用与小鼠类似。令人惊讶的是,我们发现chd8突变导致小脑浦肯野细胞前体减少,并且分化成熟的浦肯野细胞总体数量大幅减少,其分布格局也发生改变,表明浦肯野细胞的分化成熟和迁移障碍。这些结果与小鼠中的发现似乎矛盾,这可能与小鼠中敲除Chd8的时间是在出生后有关,因此我们推测Chd8可能在胚胎期调节浦肯野细胞的发育,正如我们观察到的斑马鱼中chd8突变导致浦肯野细胞前体发育缺陷。同时,我们发现在chd8突变体中,与浦肯野细胞发育密切相关的维甲酸相关孤核受体（roraa）表达水平降低,类似于孤独症病人小脑RORA表达降低的现象。在胚胎发育早期用RORA的转录激动剂SR1078处理后,chd8突变所致小脑浦肯野细胞发育缺陷在一定程度上得到改善,进一步表明chd8在胚胎早期调节浦肯野细胞的发育。综上,本课题研究发现孤独症基因chd8既调节小脑颗粒细胞的发育,也调节浦肯野细胞的早期发育,为进一步研究chd8通过调节小脑发育参与孤独症的致病机制打下实验基础,也为改善孤独症症状提供了潜在研究靶标。