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研究背景与意义:高血压是全球范围内常见的慢性疾病,是导致其它心血管疾病的主要病因,严重威胁着人类的健康,并对社会经济和疾病负担有着重大影响。同时,高血压作为心血管疾病最主要的可干预危险因素,阐明高血压的发病机制与危险因素对于预防和管理心血管疾病有着重要意义。最新研究发现,corin可将心房利钠肽前体（pro-ANP）转化成有活性的ANP,从而参与血压和心脏功能的调节。因此,corin与高血压的发病机制有密切关系。作为连接基因与环境的媒介,DNA甲基化在基因表达的调控中扮演重要角色,corin的编码基因CORIN基因启动子区域DNA甲基化可能影响corin正常表达,从而参与高血压发病机制。目前尚没有关于CORIN基因甲基化与高血压的研究。并且以往的研究多是分析候选基因单个CpG位点与疾病的关联性,然而,单个CpG位点甲基化与疾病关联性的精准度较低。因此,本研究通过检测CORIN基因启动子区域多个位点的甲基化,拟用横断面分析、纵向分析以及前瞻性分析,在CpG位点水平和基因水平系统地探索CORIN基因启动子区域DNA甲基化与血压水平、高血压患病、发病之间的关联性。研究方法:姑苏队列是一项基于社区的前瞻性研究,旨在探究苏州地区常住居民高血压和心血管病的新危险因素及防控措施。于2010年采用多阶段整群随机抽样方法,纳入了苏州市姑苏区8个社区2706名居民。在排除数据不完整和血液样本缺乏者后,最终2498名参与者被纳入了本研究。随后于2014年对该人群进行随访,测量血压,收集心血管疾病的发生情况,并调查了其它相关信息。基线调查和随访调查均采用调查问卷进行收集资料,包括人口统计学资料、生活方式和疾病史等资料。现场测量数据包括身高、体重以及血压等,均按照标准的测量方法进行测量。血液标本由专业医务人员收集,参与者在禁食一晚（至少8小时）后次日早晨抽取血液标本,并冷藏送至实验室,一部分进行血常规与血清检测,包括血细胞计数、空腹血糖（Fasting Plasma Glucose,FPG）、总胆固醇（Total Cholesterol,TC）、甘油三酯（Triglyceride,TG）、高密度脂蛋白胆固醇（High Density Lipoprotein Cholesterol,HDLC）等指标。一部分血液标本于-80℃冰箱中冷冻保存备用。采用目标亚硫酸氢盐测序的方法对CORIN基因启动子区域DNA甲基化水平进行量化检测,甲基化水平β值（0-100%）是甲基化碱基所占比例,用百分数表示。对基线资料,用Spearman相关系数描述CORIN基因启动子区域各CpG位点的甲基化水平与基线收缩压（Systolic Blood Pressure,SBP）、舒张压（Diastolic Blood Pressure,DBP）之间的相关关系,用线性回归模型分析CORIN基因启动子区域DNA甲基化水平与血压的关联性,用Logistic回归模型分析CORIN基因启动子区域DNA甲基化水平与高血压患病的关联性。对纵向重复测量资料,用线性混合效应模型进行纵向分析,分别以SBP和DBP的重复测量为因变量,分析基线CORIN基因启动子区域各CpG位点DNA甲基化水平对SBP和DBP的影响作用,调整性别、受教育程度和重复测量的年龄、吸烟、饮酒、BMI、空腹血糖、血脂、降压药的服用情况以及时间变量,参与者为随机效应;采用Logistic回归模型,分析CORIN基因启动子区域各CpG位点DNA甲基化水平与高血压发生的关联性,调整随访时间以及性别等其它协变量（同前）。用求平均值法和加权截断乘积法（weight Truncated Product Method,wTPM）分析基于基因水平（gene-based）的CORIN基因启动子区域DNA甲基化水平与血压、高血压的关联性。应用SAS9.4和R x64 3.6.0进行统计分析,检验水准α设为0.05。在多个CpG位点的多重检验中,FDR调整P值（即q值）小于0.05认为有统计学意义。通过生物信息学分析,对COIRN基因进行了基因本体论（Gene Ontology,GO）生物学过程分析。同时构建了涉及CORIN基因的蛋白互作分析网络图谱。研究结果:（一）研究对象的基线特征2498名参与者基线时平均年龄为52.7岁;男性参与者共962位（38.51%）,女性1536位（61.49%）;平均血压水平为收缩压130.1±17.1 mmHg,舒张压84.8±9.2 mmHg;患高血压的人数为1109,高血压患病率为44.40%。与非高血压组相比,高血压组的男性占比更大,年龄更大,吸烟和饮酒率均更大（所有P＜0.001）;高血压组体质指数（Body Mass Index,BMI）、FPG、TC、TG 以及低密度脂蛋白胆固醇（Low Density Lipoprotein Cholesterol,LDLC）均高于非高血压组,而HDLC低于非高血压组。CORIN基因启动子区域各CpG位点中,仅CpG1和CpG6的DNA甲基化水平在高血压组和非高血压组间存在统计学意义（P 均＜0.05）。（二）CORIN基因启动子区域DNA甲基化水平与高血压患病的关联性CORIN基因启动子区域9个CpG位点DNA甲基化水平与基线SBP水平均呈现负相关关系（P＜0.05）,7个CpG位点（除CpG5和CpG9外）与基线DBP水平呈现负相关关系（P＜0.05）,Spearman相关系数rs均在-0.11～-0.03之间。在调整了年龄、性别、教育水平、吸烟、饮酒、BMI、空腹血糖、血脂和降压药物使用情况后,9个CpG位点甲基化水平均与SBP和DBP水平呈负关联,偏回归系数β在-0.97～-0.20之间,且FDR多重调整之后,q值均＜0.05,具有统计学意义。加权截断乘积法显示,在基因水平CORIN基因启动子区域DNA甲基化与SBP和DBP的关联性也存在统计学意义。调整混杂因素后,仅CpG1甲基化水平与高血压存在关联性,P值为0.036,甲基化水平每增加5%,患高血压的风险降低 4%,OR（95%置信区间,Confidence Interval,CI）为 0.96（0.92,1.00）,但是经FDR调整后,q值大于0.05,无统计学意义。（三）CORIN基因启动子区域DNA甲基化水平与动态血压的关联性在2014年的随访中,共随访到2194人。随访到的参与者随访时的FPG、TG、LDLC均比基线调查时高（P均＜0.001）,而饮酒率、HDLC、TC、SBP和DBP水平均低于基线调查时的水平（P均＜0.001）。以重复测量的SBP、DBP分别为因变量,用线性混合效应模型分析了基线时CORIN基因启动子区域CpG位点的DNA甲基化水平对血压的影响作用,调整性别、教育水平和重复测量的年龄、吸烟、饮酒、BMI、空腹血糖、血脂、是否服用降压药以及时间变量。结果显示,9个CpG位点的甲基化水平与SBP均呈负关联（P均＜0.05）,偏回归系数β在-0.62～-0.22,在FDR多重调整后,所有CpG位点仍具有统计学意义（q均＜0.05）。除CpG5外,8个CpG位点的甲基化水平与DBP呈负相关关系,偏回归系数β在-0.32～-0.18区间内,在FDR多重调整后,6个CpG位点（除CpG3、CpG4和CpG5外）仍具有统计学意义（q均＜0.05）。使用平均值法和wTPM法探究在基因层面的关联性,CORIN基因启动子区域DNA甲基化与SBP和DBP的关联性也均存在统计学意义（P＜0.05）。（四）CORIN基因启动子区域DNA甲基化水平与高血压发病风险的关联性在参与随访的2194人中,排除983人基线患有高血压,共1211人纳入前瞻性分析。其中,新发高血压168人,高血压累计发病率为13.87%。9个CpG位点的甲基化水平以及9个位点甲基化的平均水平在未纳入与纳入人群中均无统计学差异（所有P＞0.05）。Logistic回归分析显示,9个CpG位点中,仅CpG1和CpG6甲基化水平与高血压发病的关联性有统计学意义。CpG1和CpG6甲基化水平每增加5%,4年后发生高血压的风险分别降低9%和11%,OR（95%CI）分别为0.91（0.83,1.00）,0.89（0.80,0.99）。但FDR调整后均无统计学意义。wTPM结果显示,在基因水平CORIN基因启动子区域DNA甲基化对高血压发病的影响具有统计学意义（P=0.007）。（五）CORIN基因参与高血压可能的生物学通路CORIN基因参与多条与高血压发病有关的生物学通路。CORIN基因与多个基因联合作用于循环系统过程、心脏收缩调节、血液循环、血压调节等多个生物途径,在高血压的发病过程中发挥了关键作用。结论:1.CORIN基因启动子区域DNA甲基化水平与血压水平存在关联性。2.CORIN基因启动子区域DNA甲基化水平与高血压的发病相关联。