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片形吸虫病是由大片吸虫和肝片吸虫引起的一种危害反刍动物的严重的寄生虫病,成虫寄生在胆管中,导致肝硬化、贫血,引起宿主生长发育受阻、使役能力、泌乳量及生殖能力下降,带来极大的经济损失。尽管大片吸虫和肝片吸虫在生活史上是相似的,但从流行病学上的特点来看,这两个种是有差异的。为在细胞和分子水平上弄清宿主-片形吸虫的相互作用机制,寻找宿主抗寄生虫的免疫效应机制和抑制寄生虫抗宿主的逃避机制,从而研制出高效的疫苗,本实验室开展了“片形吸虫病免疫机制研究”的工作,本研究为其前期工作,包括建立一个实验室内培养大片吸虫囊蚴的方法、建立一套实验感染、检测免疫反应的方法,探讨大片吸虫感染终末宿主的机制,比较大片吸虫和肝片吸虫的不同,为下一步的工作打下良好的基础。 本实验共感染500个螺,成活233个,成活率为46%,共产囊蚴16000余尾,平均产70尾。培养螺蛳关键在于温度、密度、感染毛蚴的个数和通氧情况。实验发现,虫卵发育为毛蚴的时间随温度升高而缩短,随温度降低而延长,吸虫在螺内的发育也与温度有关。用空调和加热器调节室内温度保持在25-28℃时,15-17天虫卵可发育至毛蚴,38-42天尾蚴逸出、囊蚴形成。密度以1个螺/20cm~2为宜。感染比例以每个螺感染1-2个毛蚴为最佳。在湿润并保持低温(4-10℃)的条件下,囊蚴可保持活力达半年 马 丽 家兔实验感染片形吸虫的免疫学研究 上 以上。饲料以生莱为主,辅以奶扭和杨树叶。培养羹蝴成功的关键在于保 证螺间的成活率和毛黝感染螺蛹的感染率。本实验进一步证实了在广西大 片吸虫的中间宿主为小土蜗螺。 用大片吸虫分涎排泄抗原的酶联免疫吸附试验检测人工感染肝片吸 虫和大片吸虫的兔血清中特异性抗体的动态变化,ES抗原用量为0.25 p g/孔,血清和二抗的稀释倍数分别为400倍和4000倍。检测结果表明, 感染肝片吸虫和大片吸虫的兔均在 2刁周出现抗体且 lgG逐渐升高,但感 染大片吸虫的兔的抗体升高缓慢,感染肝片吸虫的兔的抗体升高迅速,且 长时间锥持高幢期。对比吸虫量、囊蜘感染成活率和病理变化证实两种片 形吸虫免疫机制不同。本实验不仅对抗体变化进行了动态测定,同时也提 供了一个 EL SA诊断片形吸虫病的方洁。