NRF2通过调控CXCR4的表达对乳腺癌细胞增殖能力的影响

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目的:探讨乳腺癌细胞中NRF2基因靶向调控CXCR4基因表达的影响以及对细胞增殖能力的影响。方法:1.通过质粒转染技术,使乳腺癌细胞内的NRF2基因及CXCR4基因表达改变。2.通过荧光定量PCR检测NRF2基因mRNA的表达水平。3.通过Western blot检测CXCR4基因在乳腺癌细胞的蛋白表达水平。4.通过MTT实验观察上调NRF2基因、下调NRF2基因及上调NFR2基因同时下调CXCR4基因对乳腺癌增殖能力的影响。分组:A组:转染NRF2过表达质粒的MCF-7细胞;B组:转染shRNA-NRF2的MCF-7细胞;C组:转染NRF2过表达+shRNA-CXCR4的MCF-7细胞;D组:阴性对照组;E组:空白对照组。结果:1.qRT-PCR结果:D组的NRF2基因相对表达水平为(1.053±0.026),E组的NRF2基因相对表达水平为(1.028±0.060),相互比较无统计学差异;A组中的NRF2基因相对表达水平为(61.530±0.39),与D组比较,P<0.01,有显著统计学差异;B组中NRF2基因相对表达水平为(0.230±0.03),与D组比较,P<0.01,有显著统计学差异;C组中NRF2基因相对表达水平为(51.070±1.05),与D组比较,P<0.01,有显著统计学差异。2.Western Blot结果:D组与E组在对比中,其CXCR4基因的相对表达量分别为(0.978±0.078)、(1.033±0.013),相互比较无统计学差异(P=0.595>0.05);A组与D组对比中,A组的CXCR4的相对表达量(1.829±0.057)高于D组(1.042±0.058)(P=0.0001<0.01);在B组与D组对比中,B组的CXCR4的相对表达量(0.955±0.146)低于D组(2.153±0.211)(P=0.038<0.05);在A组、C组及D组的对比中,A组的CXCR4的相对表达量(2.043±0.093)高于D组(1.435±0.044)(P=0.004<0.01)及C组(0.939±0.071)(P=0.001<0.01)。3.MTT法结果D组与E组比较,两者24h、48h、72h OD值无统计学差异(P=0.686(24h)、P=0.755(48h)、P=0.133(72h))。A组24h、48h、72h后,OD值分别为0.734±0.019,0.961±0.011,1.225±0.031,与D组对比差异性显著;B组24h、48h、72h后,OD值分别为0.434±0.017,0.571±0.029,0.702±0.018,与D组对比差异性显著;C组24h、48h、72h后,OD值分别为0.478±0.002,0.641±0.035,0.819±0.021,与A组对比差异性显著。结论:NRF2基因可能通过上调乳腺癌细胞中CXCR4基因的表达而增强其增殖能力。NRF2基因可能为乳腺癌靶向治疗的潜在靶点。
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