两株芽孢杆菌促生机制的研究

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植物根际促生菌可通过溶磷、固氮、解钾、产生吲哚乙酸等物质直接促进植物生长,也可通过分泌铁载体、ACC脱氨酶等增强植物的抗逆能力。本研究通过对茶树根际分离到的促生菌HP9、HP10两株菌进行鉴定,通过测定其溶磷、产ACC脱氨酶及铁载体的能力分析促生特性,通过盆栽实验研究两株菌单一及混合接种花生后对花生生长、根际微生物多样性及土壤肥力的影响,以及利用利福平标记技术动态监测两菌株在花生根际土壤及植株中的定殖状况,探究和解析两菌株对花生的促生机制。研究结果如下:根据其形态特征、生理生化试验及分子生物学鉴定,将HP9菌株鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis),HP10菌株为坚强芽孢杆菌(Bacillus firmus)。促生特性研究表明,HP9及HP10菌株均具有溶磷能力,且在以葡萄糖为碳源、硝酸钾和硫酸铵分别为氮源时溶磷能力最佳;代谢组学分析显示,HP9菌株可以显著提高乳酸、顺丁烯二酸及草酸的含量,新合成并分泌葡萄糖庚酸及硫磺酸等有机酸;而HP10则增加了培养液中5-氨基戊酸含量,新合成了抗坏血酸等有机酸,两菌株通过分泌不同类型的有机酸导致培养液p H值降低达到溶磷目的。此外,两菌株均能分泌铁载体,HP9菌株还能分泌ACC脱氨酶。盆栽试验表明,HP9、HP10菌株单一或混合接种均促进了花生植株的全长、株高、鲜重的增长,显著提高了花生根际土壤中可供植物直接吸收利用的碱解氮含量,有效磷和速效钾含量也有所提高。对接种组花生根际土壤的细菌和真菌多样性分析结果显示,3个接种组的根际土壤中拟杆菌门、变形菌门、Mortierellomycota的相对丰度显著增高,疣微菌门、酸杆菌门、油壶菌门的相对丰度明显降低;从属的水平上看,黄杆菌属、节丛孢属的相对丰度显著提高,慢生根瘤菌属(Bradyrhizobium)、蜡壳菌属的相对丰度显著降低。监测利福平标记菌株的定殖状况表明,在HP9、HP10及混合菌株接种组的花生根际土壤及植株的根、茎、叶中均检测到了抗性标记菌株。总之,两株芽孢杆菌属菌株HP9和HP10均具有溶磷、产铁载体的能力,接种花生后通过菌株的直接促生特性,提高了土壤营养元素水平;并通过定殖在花生根际土壤及植株组织中,影响根际土壤微生物的活动,促进花生植株的生长,研究较为全面地解析了两株芽孢杆菌对花生的促生机制,研究结果为进一步开发促生菌剂奠定了基础。
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