目的近年来由于用眼过度、电子产品使用、人口老龄化、环境恶化等因素,眼部疾病的发病趋势愈来愈高。青光眼、结膜炎、视网膜病变等许多眼病如不能及时和有效的治疗最终会反复发作甚至发生失明的严重后果。构建眼部药物递送系统,提高药物眼部屏障的渗透率,改善药物眼部生物利用度,是眼部疾病治疗的重要研究方向。眼睛的玻璃体内富含大量透明质酸,透明质酸用于眼部给药具有保湿润滑作用;透明质酸也可以作为眼部纳米系统的载体材料,具有良好的生物相容性。本文设计并构建了水溶性大分子透明质酸的白蛋白纳米粒,考察纳米粒对眼部的刺激性以及眼部不同部位药物的累积量,评价其作为治疗眼部疾病药物和载体的可能性与科学性。方法分别建立了分别采用UV-Vis分光光度法、HPLC-FLD法测定透明质酸(HA)与罗丹明B(RhoB)含量的方法;以粒径与Zeta电位为考察指标,采用复乳液法优化了透明质酸白蛋白纳米粒(HA-BSA NPs),利用水相-W/O初乳和乳化剂伪三元相图确定不同亲水乳化剂比例、体系pH值、W/O型初乳与乳化剂的比例。采用动态激光散射法、透射电镜扫描法、微柱离心法分别测定粒径、形态、包封率和载药量等制剂学性质。通过离体角膜渗透试验,考察纳米粒的角膜渗透率。通过结膜囊内给药,Draize实验与HE染色显微实验,考察纳米粒的眼部刺激性。以RhoB为水溶性荧光探针考察HA-BSA NPs经结膜囊内给药后不同时间在家兔眼部不同生物基质中的含量,考察纳米粒在家兔眼睛角膜、结膜、玻璃体、晶状体组织分布情况,确认所制备纳米粒的眼部递送过程。结果确定采用复乳法制备HA-BSA NPs所用的复合乳化剂为酪蛋白酸钠(SC)与泊洛沙姆188(F68),二者的比例为3:2,体系的pH为5.0和7.0。所制备纳米粒的粒径约200 nm且分布均匀,Zeta电位为-19mV和-40mV左右,包封率均大于85%,载药量大于5μg/mg。纳米粒的离体角膜渗透率在1.8%左右,家兔Draize眼部刺激性试验与HE组织染色试验结果表明结膜囊内注射给药后,家兔眼部组织未见明显异常,刺激性较小。载RhoB荧光探针的HA-BSA NPs与溶液组相比,结膜囊内给药后,家兔眼组织中各部位的累积量均有提高,其中Zeta电位为-40mV的纳米粒对玻璃体和晶状体均有较好的递送效果,而电位为-19mV的纳米粒在角膜中累积最多,两种纳米粒都在晶状体中分布较少。结论采用复乳法能够用于水溶性大分子纳米粒的制备,通过控制体系的pH值可以得到不同Zeta电位的纳米粒。角膜是HA-BSA NPs转运至眼内的主要屏障,所制备的纳米粒经结膜囊内给药对眼睛刺激性较小,通过结膜囊内注射可以有效地躲避角膜屏障并能到达眼后部(玻璃体、晶状体),Zeta电位对于纳米粒在眼组织中转运具有一定影响,当Zeta电位较低时(-40mV),纳米粒在家兔眼部玻璃体与晶状体中累积较多,期望其能够作为眼后部疾病治疗的载药体系。