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第一部分体外培养白血病细胞不同分割照射方式细胞存活率的比较目的:探讨相同剂量下不同分割照射方式对人白血病细胞K562和S-801存活率的影响。方法:体外培养人白血病细胞K562和S-801,进行半固体培养基集落形成实验,RADIO-MED软件拟合剂量-存活曲线,得到相关参数D0、Dq、N值,分析白血病细胞的亚致死性损伤修复能力,并对比相同剂量下单次照射组与分次照射组(8Gy vs 4Gy×2;12Gy vs 2Gy×2×3)的细胞存活率差异。结果:1. K562和S-801两种白血病细胞的剂量-存活曲线肩段都很窄,Dq值分别为0.39和0.28;2.相同剂量下单次与分次照射细胞存活率无显著差异(P>0.05)。结论:白血病细胞的亚致死性损伤修复能力很弱,在分次照射间期几乎不存在放射损伤修复,相同剂量下单次照射与分次照射效应相似。第二部分不同分割照射方式对大鼠T淋巴细胞及亚群CD4+Th/CD8+CTL清除的影响以及对正常组织损伤的评价目的:探讨相同剂量下不同分割照射方式对大鼠T淋巴细胞及亚群CD4+Th/CD8+CTL的清除和正常组织损伤的影响。方法:健康成年SD大鼠45只随机分为空白对照组、Ⅰ8Gy组、Ⅱ4Gy×2组、Ⅲ12Gy组、Ⅳ2Gy×2×3组,模拟人全身放疗照射技术,采用6MV X射线全身照射,剂量率10cGy/min,照射后第3天和第7天尾静脉采血,观察外周血白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板变化;照后第七天尾静脉采血,流式细胞仪检测T淋巴细胞及其亚群CD4+Th/CD8+CTL变化;分别于照射后第1天和第14天取大鼠肺组织采用免疫组织化学染色法,半定量分析TGF-β1蛋白在肺组织中的表达,比较不同分割照射方式放射性肺损伤程度,激光共聚焦显微镜观察TGF-β1蛋白在肺组织中的定位;TBI后两周取大鼠肝肾组织常规HE染色观察放射损伤病理组织学变化,血生化分析仪测定大鼠肝功能指标ALT、肾功能指标BUN。结果:1.大鼠全身照射后外周血中红细胞与血红蛋白在观察期间无明显变化,白细胞与血小板呈剂量依赖性降低,白细胞下降最为显著。2. T淋巴细胞总数及CD4+Th/CD8+CTL细胞数在TBI后明显下降,下降幅度与受照剂量相关,相同剂量下单次照射与分次照射效应无显著差异(P>0.05)。3.照射后1天及14天大鼠肺组织TGF-β1蛋白免疫组化染色,TGF-β1蛋白在肺组织中的表达水平照射后第1天,8Gy组与4Gy×2组无显著差异(P>0.05),其余各组显示分次照射较相同剂量下的单次照射表达水平低(P<0.05),分次照射2Gy×2×3组TGF-β1蛋白表达水平与单次照射8Gy组无显著差异(P>0.05)。4.各TBI照射组肝功能指标ALT、肾功能指标BUN与对照组无显著差异(P>0.05),观察期间肝脏、肾脏病理组织学变化较轻。结论:全身放疗采用分次照射技术,可适当增加照射剂量,增加对白血病细胞和T淋巴细胞及其亚群CD4+Th/CD8+CTL的清除,可保护正常组织特别是肺组织的放射损伤。